科研产出
侵染洋桔梗的烟草曲茎病毒分子鉴定及遗传进化分析
2025
摘要：目的明确引起广西南宁市洋桔梗呈现叶脉突起、叶片皱缩的病毒病原，并对病毒分离物的遗传进化关系进行分析，为花卉作物病毒病的综合防控提供理论依据。方法以1株具有叶脉突起、叶片皱缩等典型双生病毒症状的洋桔梗为研究对象，采用双生病毒通用简并引物（PA/PB）对洋桔梗叶片总DNA进行PCR检测，通过设计背靠背引物（TbCSV-F/TbCSV-R）、基因克隆获得相关病毒病原的全基因组序列，使用BLASTn对拼接序列进行比对分析，应用生物学软件SnapGene、SDT和MEGA 7.0对相关病毒病原的全基因组序列及遗传进化进行分析。结果利用PA/PB引物能从样品中扩增出1条约500 bp的特异目的条带，BLASTn分析发现，所得序列与GenBank上已登录的烟草曲茎病毒（Tobacco curly shoot virus，TbCSV）各分离物的核苷酸序列相似性均在91%以上，证实所采集的洋桔梗植株受到菜豆金色黄花叶病毒属病毒侵染。利用β卫星通用引物（β01/β02）未能扩增出条带，证实染病的洋桔梗叶片中不存在β卫星分子。利用TbCSV-F/TbCSV-R对感病样品总DNA进行PCR扩增，所得产物经纯化、克隆测序及序列拼接后获得1条长度为2743 bp的病毒全基因组序列，所得序列经核苷酸序列相似性分析表明病毒分离物为TbCSV的1个分离物，命名为TbCSV-GX-YJG。氨基酸同源性分析发现，病毒正链编码的AV1和AV2基因与TbCSV-SHJ01（GenBank登录号：MW779539.1）的核苷酸序列和氨基酸序列相似性均最高，为100%。进化树分析发现，TbCSV-GX-YJG与来自于广西（TbCSV-SHJ01）和四川（TbCSV-SC740，GenBank登录号：MH165181.1）的分离物聚在同一个小分支，说明亲缘关系较近；而与来自于云南（TbCSV-CN，GenBank登录号：KM383752.1）、孟加拉国（TbCSV-YT8，GenBank登录号：HG003650.1）、印度（TbCSV-WSF1和TbCSV-TC240，GenBank登录号分别为HQ407395.1和KF551584.1）的分离物处于不同的分支，说明TbCSV分离物具有一定的进化多样性。结论侵染广西洋桔梗表现叶脉突起、叶片皱缩的病毒病原为菜豆金色黄花叶病毒属的TbCSV。
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不同培养基及ZT诱导对洋桔梗玻璃化的影响
《广西农业科学 》 2009
摘要：以洋桔梗叶片为材料,以培养基MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.2mg/L为对照,将在对照培养基上培养的叶盘转接到含不同激素组合(6-BA 0.2～0.5mg/L、IBA 0.05～0.1mg/L、NAA 0.01～0.2mg/L、ZT 0.5～1.0mg/L)的培养基中培养30d;将不同分化时期的愈伤组织每隔3d转接到MS培养基中培养30d,观察洋桔梗不定芽分化情况。结果表明,将已诱导15d的叶盘转接到MS+6-BA 0.3mg/L、MS+6-BA 0.4mg/L+IBA 0.05mg/L培养基中培养,利于正常不定芽的生长,分化总芽数和正常芽总数、平均每叶盘正常芽数明显高于对照,正常苗率与对照相差不明显。此外,将现芽点6d以前的不同分化程度的愈伤组织接到MS培养基中,则不利于正常不定芽的诱导分化;将现芽点第6d的愈伤组织转接到MS培养基中继续培养,其总分化芽数、正常芽总数、平均每叶盘正常分化芽数均高于对照而正常苗比率与对照相差不明显,说明现愈伤后不定芽的分化还继续需要外源激素的参与,以减少不定芽的玻璃化。
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国内洋桔梗组培快繁技术的研究进展
《北方园艺 》 2008 北大核心
摘要：通过查阅现有洋桔梗组织培养资料,对洋桔梗组培快繁技术体系的研究进展进行了综述,主要介绍了洋桔梗组织培养中的外植体的选择、初代培养、增殖培养、生根培养及练苗移栽等程序的研究进展。
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洋桔梗离体快繁技术研究
《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：[目的]建立洋桔梗高效的快速繁殖体系,为工厂化生产提供可行的操作程序。[方法]以国外进口的洋桔梗F1代种子(品种名称为Polestar yellow)无菌苗的叶片为外植体,对不定芽的诱导、单芽增殖、无菌苗生根等进行了研究。[结果]结果表明:6-BA和IBA组合对洋桔梗叶片不定芽的诱导效果较6-BA和NAA组合好,叶片最佳的分化培养基为MS+6-BA0.6 mg/L+IBA0.04 mg/L,1个月内正常芽平均分化数为8.3;最佳的单芽增殖培养基为MS+6-BA0.8 mg/L+NAA0.04 mg/L,1个月内正常芽的增殖倍数为7.4;无菌苗在含有IBA0.25 mg/L的1/2 MS培养基上,生根率、平均每苗的根数均最大。[结论]该结果为洋桔梗的工厂化生产奠定了基础。
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