聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究

王双双; 刘倩倩; 赵芳; 王发合; 周河治; 杨辉; 《南方农业学报 》 2013 CSCD

摘要：【目的】探讨类芽孢杆菌胆固醇氧化酶(COD)的固定化,为COD的应用研究提供参考依据。【方法】以不同浓度的聚乙烯醇、硼酸为主要材料制备固定化酶,并通过试验确定制备固定化酶的最适浓度、最佳反应温度、最适pH、热稳定性、酸稳定性、米氏常数及操作稳定性。【结果】选用12%聚乙烯醇、5%硼酸制备的固定化酶形状好、强度适中、易操作、固定化率高,其最适反应温度60℃,最适反应pH7.0,热、酸稳定性比游离酶好,且稳定范围较游离酶宽,表观米氏常数Km(2.55×10-5mol/L)相对游离酶变小,重复使用5次后酶活力仍能保持在67.8%以上,半衰期为8.91次。【结论】聚乙烯醇制备的固定化COD稳定性好,与底物亲和力较强,可重复回收利用,具有良好的应用前景。

关键词： 聚乙烯醇 胆固醇氧化酶 固定化 酶活性 稳定性 米氏常数