芒果MiKAO1基因的克隆、亚细胞定位及表达分析

荣涛; 张宇; 黄国弟; 庞新华; 单彬; 朱杨帆; 张继; 陆祖双; 《分子植物育种 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：贝壳杉烯酸氧化酶（ent-kaurenoic acid oxidase， KAO）是赤霉素（Gibberellins， GAs）生物合成途径中关键酶之一。赤霉素具有调控植株生长的作用，本研究为深入解析KAO基因在芒果生长发育的功能提供一定理论依据。对‘桂热芒82号’（Mangifera indica L. cv. Guire No.82）中KAO基因进行克隆、亚细胞定位和表达分析。以‘桂热芒82号’叶片为材料提取RNA，进行RT-PCR得到cDNA，再通过RACE得该基因序列，并将该基因命名为MiKAO1。MiKAO1全长为2 256 bp，3’非翻译区约2 500 bp，5’非翻译区约2 500 bp。MiKAO1序列均含有完整的开放阅读框，编码517个氨基酸，与阿月浑子（XP＿031279374.1）的序列相似度为83.17%。MiKAO1编码的蛋白分子量为58 710.13 Da，等电点为8.67，推测为稳定蛋白，无信号肽，无明显疏水区，存在较明显跨膜结构域。利用共聚焦激光扫描显微镜发现MiKAO1编码蛋白定位于细胞质中。基因表达分析显示，’MiKAO1基因在芒果萌芽期、开花期、坐果3～4周、坐果7～8周和果实成熟期‘金煌芒的表达量无明显差异；而该基因在‘桂热芒82号’的表达量呈现先上升再下降的变化趋势，说明通过MiKAO1基因的表达量的变化情况无法判断该基因是否具有调控矮化性状的作用。

关键词： 桂热芒82号 亚细胞定位 表达分析 MiKAO1 矮化