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甘蔗eEF1A反义表达载体构建及其遗传转化研究

文献类型： 中文期刊

作者： 王爱勤 1 ; 黄文静 1 ; 杨丽涛 1 ; 李杨瑞 2 ;

作者机构： 1.广西大学农学院

2.广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室

关键词： 甘蔗;eEF1A;反义转基因;遗传转化

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2009 年 22 卷 03 期

页码： 579-583

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 延伸因子eEF1A(Eukaryotic elongation factor 1A)是在核糖体催化氨基酸链延伸以及推动、控制蛋白质合成过程中起重要作用的蛋白质因子。利用RT-PCR技术扩增得到甘蔗eEF1A的编码区1420 bp的cDNA序列,反向连接到受体质粒pB I121载体中,构建含GUS基因的甘蔗eEF1A基因反义植物表达载体pB IantiEF。用冻融法将pB IantiEF导入根癌农杆菌菌株EHA105中,通过农杆菌介导法,将eEF1A反义基因转化烟草K346。将获得的43株抗卡那霉素烟草经PCR筛选,得到38株呈阳性的反义转基因植株,阳性植株再经Dot-Southern杂交检测,证明eEF1A基因已整合进其中的34株烟草基因组中,平均转化率为79%。反义转基因烟草植株移栽后表型出现不同程度的变异,叶片变厚,卷曲不能平展,叶背出现明显皱折,并外突成芽,茎、叶的伸长明显受阻,顶芽出现双芽,开花延迟。推测甘蔗延伸因子eEF1A可能与甘蔗茎、叶伸长生长和发育有关。

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