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番木瓜幼叶原生质体分离研究

文献类型： 中文期刊

作者： 陆国昆 1 ; 廖芬 2 ; 黄茂康 2 ; 黄伟雄 2 ; 黄僚才 3 ;

作者机构： 1.南宁市西乡塘区心圩街道办事处

2.广西农业科学院园艺研究所

3.南宁市老口子农林业科技有限公司

关键词： 番木瓜;幼叶;原生质体;分离

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2011 年 42 卷 05 期

页码： 12-14

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】探讨番木瓜幼叶原生质体的最佳分离条件。【方法】以20～30日龄番木瓜无菌苗幼叶为材料,对原生质体分离过程中酶液组合、酶解时间、纯化离心速度(500～1500rpm)及离心时间(6～10min)进行探讨。【结果】随着酶解液中纤维素酶和果胶酶含量的提高,番木瓜原生质体产量逐渐升高,而其活力逐渐降低,其中以为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶组合的效果较好,解离时间以8h为宜。随着酶解液中甘露醇浓度的升高,原生质体的产量呈现先增加后降低的趋势,在0.55mol/L时达到最大(2.48×106个/gFW)。在悬浮纯化原生质体时,以1000rpm离心6～8min的效果较好。【结论】适宜原生质体分离的酶解液为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶+25mmol/LMES+0.55mol/L甘露醇,最适酶解时间为8h;在原生质体纯化时,使用1000rpm离心6~8min,有利于获得产量及活力较高的原生质体。

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