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2种不同形态不依赖Ca~(2+) α-淀粉酶的纯化与表征

文献类型： 中文期刊

作者： 申乃坤 1 ; 秦艳 1 ; 朱婧 1 ; 王青艳 1 ; 何冰芳 1 ; 黄日波 1 ;

作者机构： 1.南京工业大学生物与制药工程学院;广西科学院广西生物炼制重点实验室非粮生物质酶解国家重点实验室国家非粮生物质能源工程技术研究中心

关键词： 耐酸;淀粉酶;枯草芽胞杆菌;钙;水解产物

期刊名称： 生物加工过程

ISSN： 1672-3678

年卷期： 2012 年 10 卷 05 期

页码： 44-49

收录情况： CSCD

摘要： 纯化表征了枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis CN7产生的2种不同形态的不依赖Ca2+的α-淀粉酶,对其酶解产物进行了高效液相色谱(HPLC)分析。结果表明:通过加热除杂、超滤、(NH4)2SO4沉淀和分子筛层析,一次性获得了纯化倍数提高36倍的电泳纯成熟肽形式α-淀粉酶Amy7B和提高75倍的截短体形式α-淀粉酶Amy7S;Amy7B和Amy7S的最适pH为6.5,最适温度为65℃,酶活性均不依赖于乙二胺四乙酸(EDTA)和Ca2+;酶解产物主要由葡萄糖和麦芽糖组成。Amy7B的相对分子质量为6.7×104,半衰期温度为59.6℃,比活力为(905.99±96.52)U/mg。与之相比,Amy7S的相对分子质量小约2.0×104(为4.7×104),半衰期温度高2.7℃(为62.3℃),比活力高1.05倍(达到(1 853.87±75.61)U/mg)。

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