文献类型: 中文期刊
作者: 杜沛霖 1 ; 王跃峰 1 ; 白燕远 1 ; 朱华 1 ;
作者机构: 1.广西中医药大学;广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室;桂林医学院
关键词: 拳卷地钱;DNA提取;ISSR-PCR;正交设计;体系优化
期刊名称: 时珍国医国药
ISSN: 1008-0805
年卷期: 2014 年 06 期
页码: 1498-1500
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的建立一种拳卷地钱基因组DNA的提取方法;对影响拳卷地钱ISSR-PCR反应的各因素进行优化,建立稳定的反应体系。方法采用改进的CTAB法提取拳卷地钱基因组DNA;以Taq酶、Mg2+、dNTP和引物4因素3水平的正交设计对拳卷地钱ISSR-PCR反应体系进行优化。结果采用改进的CTAB法提取的拳卷地钱基因组DNA质量高,且适用于ISSR-PCR扩增;获得拳卷地钱最佳反应体系(20μl)为:Taq酶0.5 U,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 250μmol/L,模板DNA 50ng,引物0.6μmol/L。结论建立并优化了拳卷地钱总DNA提取方法及ISSR-PCR反应体系。
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