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高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建

文献类型: 中文期刊

作者: 李粲 1 ; 滕峥 1 ; 刘开雨 1 ; 刘芳 1 ; 邱永福 1 ; 梁朝旭 2 ; 方位宽 2 ; 何姗珊 2 ; 刘晓静 2 ; 李鸣 3 ; 梁俊 2 ; 李容柏 4 ;

作者机构: 1.广西大学农学院

2.广西甘蔗遗传改良重点实验室/广西农业科学院甘蔗研究所

3.广西作物遗传改良重点开放实验室

4.亚热带农业生物资源保护利用重点实验室

关键词: Cbcor15a;甘蔗;转基因;植物表达载体构建;瞬时表达

期刊名称: 南方农业学报

ISSN: 2095-1191

年卷期: 2012 年 43 卷 09 期

页码: 1262-1268

收录情况: CSCD

摘要: 【目的】利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGFP插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia1300-cbcor15a-bar。【方法】参照pCambia1300-bar载体多克隆位点和基因Cbcor15a、eGFP和启动子UBi-1的核苷酸序列设计引物,通过载体重组技术将基因和启动子分别插入相应的位点。利用基因枪分别将pCambia1300-bar载体和重组载体导入洋葱表皮细胞,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察。【结果】与导入pCambia1300-bar载体的洋葱表皮细胞相比较,导入重组载体pCambia1300-cbcor15a-bar的洋葱表皮细胞内有强烈的绿色荧光信号。【结论】重组甘蔗转基因二元植物表达载体启动子Ubi-1能够调控下游冷诱导基因Cbcor15a和报告基因eGFP的正常高效表达,为外源基因Cbcor15a转化甘蔗提供保障。

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