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鼠李糖乳杆菌D-(+)-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 黄靖华 1 ; 卢福芝 2 ; 孙靓 3 ; 彭立新 4 ;

作者机构: 1.广西大学

2.广西大学化学与化工学院广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心

3.广西科学院

4.广西科学院生物物理实验室

关键词: D-(+)-乳酸脱氢酶;克隆;表达;鼠李糖乳杆菌

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2010 年 0 卷 12 期

页码: 196-200

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用PCR的方法从鼠李糖乳杆菌基因组DNA中扩增到D-(+)-乳酸脱氢酶基因(ldhD),并连接到载体pSE380上,构建表达质粒pSE-ldhD,将重组质粒pSE-ldhD转化大肠杆菌BL21(DE3),重组菌株经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表明ldhD在大肠杆菌中实现了表达,表达产物的分子量约为37kD。同时采用紫外分光光度法测定D-乳酸脱氢酶的酶活,测得重组菌株的D-乳酸脱氢酶活力为5.4U/mL,最适反应温度为35℃,最适pH为5.6。

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