文献类型： 中文期刊
作者： 苗小荣 1 ; 王道波 1 ; 杨丽涛 1 ; 李杨瑞 1 ;
作者机构： 1.玉林师范学院生物与制药学院;广西农产资源化学与生物技术重点实验室;广西大学农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;中国农业科学院甘蔗研究中心/广西农业科学院甘蔗研究所
关键词： 甘蔗;蔗糖转运蛋白(SUT);基因克隆;表达分析;生物信息学分析
期刊名称： 南方农业学报
ISSN： 2095-1191
年卷期： 2018 年 10 期
页码： 1917-1923
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 【目的】克隆甘蔗蔗糖转运蛋白基因SoSUT5,分析其表达特性,并通过转化酵母突变体验证其功能,为研究SUT5基因的功能提供理论依据。【方法】以甘蔗品种桂糖28(GT28)未成熟茎cDNA为模板,采用RT-PCR从甘蔗中克隆SoSUT5基因,并进行生物信息学分析及构建系统发育进化树。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SoSUT5基因在甘蔗不同组织的表达情况,同时构建酵母表达载体并转化酵母突变体SUSY7/ura3进行基因功能验证。【结果】克隆获得的SoSUT5基因为1605 bp,编码534个氨基酸,GenBank登录号KF808328。SoSUT5蛋白的分子量和理论等电点(pI)分别为56.40 kD和8.36,具有12个跨膜结构,属于易化扩散载体(MFS)家族成员,也属于蔗糖/H+共转运体家族(GPH)成员。该蛋白具有保守的SUT蛋白功能域,是SUT5亚家族成员。在甘蔗生理成熟期,从成熟茎、花序、成熟芽和根中均能检测到SoSUT5基因表达,以在花序中的表达量最高,根次之,但在+1叶中检测不到。转pDR196空载体的酵母突变体SUSY7/ura3在以蔗糖为唯一碳源的MD培养基上不能生长,但转pDR-SoSUT5重组质粒的酵母突变体SUSY7/ura3能正常生长,说明SoSUT5蛋白具有蔗糖转运活性。【结论】SoSUT5基因编码蛋白具有转运蔗糖的生物学功能,在甘蔗蔗糖运输和积累过程中发挥调控作用。
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