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碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究

文献类型： 中文期刊

作者： 廖思明 1 ; 王青艳 1 ; 刘筱梦 1 ; 黄日波 1 ;

作者机构： 1.广西大学生命与科学技术学院

关键词： 碱性α-淀粉酶;巨大芽孢杆菌;芽孢杆菌表达系统;基因表达;酶学性质

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2011 年 0 卷 11 期

页码： 154-159

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将已克隆的碱性α-淀粉酶基因信号肽编码序列去除,用PCR的方法加入酶切位点,然后与表达载体pHIS1525连接转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-JH,并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌YYBm1原生质体,获得基因工程菌YYBm1-pHIS1525-JH。SDS-PAGE分析表明该基因在巨大芽孢杆菌中得到了有效表达。酶学性质研究表明,该酶的最适温度与pH值分别为60℃与pH8.5,在pH7.0-10.5之间具有较好的稳定性,Km值为1.94 mg/mL,酶活力可达2 516.5 U。

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