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农杆菌介导冷调节基因(Cbcor15a)遗传转化甘蔗体系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李鸣 1 ; 崔永祯 2 ; 方位宽 1 ; 梁朝旭 1 ; 何姗珊 1 ; 梁俊 1 ; 吴凯朝 1 ; 叶燕萍 2 ;

作者机构： 1.广西农业科学院甘蔗研究所

2.广西亚热带生物资源保护利用重点实验室

关键词： 农杆菌介导;冷调节基因;甘蔗遗传转化体系;建立

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2014 年 45 卷 08 期

页码： 1333-1339

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】利用农杆菌介导法,将外源冷调节基因Cbcor15a导入甘蔗愈伤组织,建立快速、高效的甘蔗遗传转化体系,为培育具抗寒性甘蔗品种奠定基础。【方法】以新台糖22号(ROC22)为材料,通过对愈伤组织诱导、分化、生根等培养基进行优化,筛选出外源基因转化甘蔗的适合激素种类与用量、PPT用量、抗生素种类与用量;利用甘蔗转基因二元植物表达载体pCambia1300-Cbcor15a-bar,通过农杆菌介导法将目的基因Cbcor15a导入甘蔗愈伤组织。【结果】当农杆菌菌液OD600为0.4、侵染20 min时有利于愈伤组织分化;甘蔗愈伤组织诱导和分化培养阶段的最佳PPT为0.50mg/L。侵染后在共培养中添加500.00 mg/L抗生素Cef能有效抑制农杆菌,添加300.00 mg/L抗生素Cef能促进愈伤组织分化成苗,添加200.00 mg/L抗生素Cef能促进幼苗生根。MS培养基中添加低量NAA更有利于甘蔗愈伤组织的分化;在促进细胞分裂时KT的效果明显优于6-BA。MS培养基中添加5.00 mg/LNAA和70.00g/L蔗糖能有效促进分化苗生根。利用建立的遗传转化体系可获得286株转冷调节基因Cbcor15a的甘蔗转化植株;选取83株通过PPT抗性筛选后长势良好的转化植株进行阳性检测,其中有4株呈阳性。【结论】利用农杆菌介导的Cbcor15a基因转化甘蔗的遗传转化体系能成功将Cbcor15a基因整合到甘蔗基因组。

  • 相关文献

[1]农杆菌介导冷调节基因(Cbcor15a)遗传转化甘蔗体系的建立. 滕峥,TENG Zheng,LI Ming,李鸣,CUI Yong-zhen,崔永祯,FANG Wei-kuan,方位宽,LIANG Zhao-xu,梁朝旭,HE Shan-shan. 2015

[2]农杆菌介导的冷诱导基因水稻遗传转化体系的建立. 崔永祯,赵红,黄格,郑爱清,李社萍,李鸣. 2020

[3]大果油茶基因组DNA提取及ISSR反应体系建立(英文). 陈伯伦,黄诚梅,吕维莉. 2011

[4]‘鸡嘴荔’果实发育及其数学模型建立与分析. 刘冰浩,朱松生,冼礼卓,林竞鸿,叶权,彭宏祥. 2013

[5]蝴蝶兰·文心兰遗传转化体系的初步研究. 卜朝阳,李杨瑞. 2008

[6]CMV-Pf-CP基因表达载体的构建及转化西番莲(Passiflora edulis)的研究. 魏源文. 2001

[7]农杆菌介导及基因枪转化在我国甘蔗遗传转化的应用研究现状. 陈丽新,谭芳,杨荣仲,陈廷速. 2006

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