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荸荠基因组DNA的提取及RAPD反应体系的建立(英文)

文献类型： 中文期刊

作者： 陈丽娟 1 ; 李杨瑞 1 ; 杨丽涛 1 ;

作者机构： 1.广西大学农学院;广西农业科学院生物技术研究所;广西农业科学院广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室

关键词： 荸荠;基因组DNA;提取;RAPD;反应体系

期刊名称： 广西农业科学

ISSN： 1002-8161

年卷期： 2009 年 40 卷 03 期

页码： 229-232

摘要： 以荸荠叶状茎为试验材料,采用改良的SDS法提取其基因组DNA,并对其RAPD反应体系进行优化,建立了荸荠的RAPD-PCR优化反应体系和程序。结果表明,提取的基因组DNA纯度和完整性较好,OD260/OD280值在1.8～2.0之间,DNA无降解现象,完全可以满足RAPD-PCR扩增要求。建立了荸荠RAPD反应体系:总体积为25μl,各有关成分的最佳浓度分别为25mmol/L Mg2+,1.0U Taq DNA聚合酶,0.2mmol/L dNTPs,1μmol/μl引物,1.5ng/μl DNA模板。PCR反应程序为:94℃预变性3min;94℃变性1min,37℃退火30s,72℃延伸60s,40个循环;最后72℃延伸10min。

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