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三种甘蔗叶片蛋白质分离纯化方法比较及双向电泳体系优化

文献类型： 中文期刊

作者： 邹成林 1 ; 丘立杭 1 ; 刘小霞 2 ; 毛江江 2 ; 杨丽涛 3 ; 李杨瑞 1 ;

作者机构： 1.广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室/广西农业科学院/广西甘蔗遗传改良重点实验室/农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室/中国农业科学院甘蔗研究中心

2.广西民族大学海洋与生物技术学院/广西微生物与植物资源利用重点实验室/广西高校化学与生物转化过程重点实验室

3.广西大学农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室

关键词： 甘蔗叶片;蛋白质纯化;SDS-PAGE;双向凝胶电泳;条件优化

期刊名称： 中国糖料

ISSN： 1007-2624

年卷期： 2017 年 39 卷 02 期

页码： 1-5

摘要： 为了优化适用于甘蔗叶片蛋白质的分离纯化方法与双向凝胶电泳体系,比较了3种蛋白质分离纯化方法对甘蔗叶片蛋白质的SDS-PAGE电泳图谱、蛋白质提取率以及双向凝胶电泳的影响,同时优化了双向电泳条件。结果显示,SDS提取法的SDS-PAGE电泳图谱中条带较少,蛋白质沉淀杂质多,效果差;三氯乙酸/丙酮沉淀法蛋白质沉淀得率高,但沉淀复溶性差,蛋白质溶液浓度低,难于满足双向电泳大胶的高上样量要求;酚抽提法蛋白质沉淀得率虽低,但沉淀纯度高、复溶性好,蛋白质溶液浓度高,是适合双向电泳分离纯化甘蔗叶片蛋白质的理想方法。酚抽提法蛋白质双向凝胶电泳合适的胶条p H范围为4~7,17 cm大胶合适的上样量为800μg,平均可分离出954个蛋白点。

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