文献类型： 中文期刊

作者： 韦美玲 ¹ ; 廖小芳 ¹ ; 李枝玲 ¹ ; 周步进 ¹ ; 郑杰 ¹ ; 孔祥军 ¹ ; 刘一丁 ¹ ; 李宏伟 ¹ ; 周瑞阳 ¹ ;

作者机构： 1.广西大学农学院;广西农业科学院经济作物研究所

关键词： 红麻;细胞质雄性不育(CMS);atp6基因;过表达载体;转化

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2019 年 12 期

页码： 2740-2746

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建红麻线粒体基因atp6过表达载体遗传转化体系,为红麻线粒体基因的遗传转化及功能研究打下基础。【方法】以红麻UG93A花药cDNA为模板,通过同源克隆技术克隆atp6基因编码区(CDS)的全长序列;利用In-Fusion基因融合技术构建植物过表达载体,通过农杆菌介导法转化野生型烟草,并对转基因阳性烟草植株进行抗性筛选和PCR验证。【结果】红麻UG93A的atp6基因CDS全长为1182 bp,成功构建红麻atp6基因全长过表达载体pBI121-atp6-EGFP,并获得4株转基因烟草植株(B1、B2、B3和B4),使用过表达载体上3对不同位点的引物组合对转基因植株进行PCR验证,发现有2株转基因烟草植株在3对不同引物中稳定表达,即获得2株含pBI121-atp6-EGFP的T_0代转基因阳性植株(B1和B2)。【结论】构建的红麻线粒体基因atp6过表达载体遗传转化体系,可用于指导后续atp6基因调控红麻细胞质雄性不育(CMS)分子机理研究。