宏基因组中不依赖辅酶B_(12)甘油脱水酶基因的筛选和表达

陈云来; 吴杰群; 韦宇拓; 杜丽琴; 黄日波; 《基因组学与应用生物学 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：通过特定的引物,以土壤宏基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得3.3 kb的DNA片段,该片段连接于pSE380载体构建重组质粒pSE380-dhaB12用于测序和表达。序列分析表明,该DNA片段编码的氨基酸序列与已报导的丁酸梭菌不依赖辅酶B12甘油脱水酶的相似性达99%。通过IPTG诱导,dhaB12基因在大肠杆菌中表达成功,SDS-PAGE分析表明有88 kD和34 kD两条蛋白质条带,在没有辅酶B12存在的情况下,所表达的酶具有明显的甘油脱水酶活性。

关键词： 宏基因组 不依赖辅酶B12 甘油脱水酶 筛选 表达