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宏基因组中不依赖辅酶B_(12)甘油脱水酶基因的筛选和表达

文献类型： 中文期刊

作者： 陈云来 1 ; 吴杰群 1 ; 韦宇拓 1 ; 杜丽琴 1 ; 黄日波 1 ;

作者机构： 1.广西大学生命科学与技术学院,广西亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心

关键词： 宏基因组;不依赖辅酶B12;甘油脱水酶;筛选;表达

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2013 年 06 期

页码： 46-50

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过特定的引物,以土壤宏基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得3.3 kb的DNA片段,该片段连接于pSE380载体构建重组质粒pSE380-dhaB12用于测序和表达。序列分析表明,该DNA片段编码的氨基酸序列与已报导的丁酸梭菌不依赖辅酶B12甘油脱水酶的相似性达99%。通过IPTG诱导,dhaB12基因在大肠杆菌中表达成功,SDS-PAGE分析表明有88 kD和34 kD两条蛋白质条带,在没有辅酶B12存在的情况下,所表达的酶具有明显的甘油脱水酶活性。

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