科研产出
新型ISSR分子标记鉴别香菇双单杂合子
《热带作物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：杂合子的鉴别是香菇杂交育种中的关键步骤，为了快速准确地鉴别香菇双单杂交后代，本研究设计一种基于区分供体亲本双核的新型ISSR分子标记技术，采用该技术对香菇野生双核菌株YX7为供体和菌株808孢子单核体为受体杂交获得的40个杂交菌株进行鉴别，并以传统的显微观察与拮抗试验和传统ISSR分子标记技术为对照。新型ISSR分析结果表明：仅拥有供体菌株YX7一个核的特异性条带的菌株有27个，可判定为杂合子；其余13个菌株均判定为非杂合子，其中有11个菌株同时拥有供体菌株YX7两个核的特异性条带，是菌株YX7自身；有2个菌株不含供体菌株YX7两个核的任何特异性条带，属于菌株808的孢子单核体。与传统显微观察和拮抗试验方法相比，新型ISSR技术鉴定出的杂合子菌株更全面，不仅包含前者鉴定出的全部19个杂合子，还包括其无法判断的菌株6个和错判为非杂合子的菌株2个。新型ISSR技术采用单个引物就可确定全部27个杂合子菌株和13个非杂合子菌株，并能根据导入的供体细胞核类别将杂合子归为2类，而传统ISSR技术需采用4个引物才能鉴别出27个杂合子，并且不能确定剩余13个菌株为非杂合子，也不能对杂合子进行分类。综上，新型ISSR技术能更快速、全面和精准鉴别香菇双单杂交菌株的杂合子和非杂合子，可为香菇杂交选育和遗传分析提供技术支撑。
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利用SCAR分子标记鉴别香菇双单杂交后代
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】利用SCAR分子标记鉴别香菇双单杂交后代，为香菇分子辅助育种提供技术支撑。【方法】通过ISSR分析获得标识供体亲本菌株YX7两个细胞核的特异性条带，根据特异性条带序列设计SCAR引物，对菌株YX7为供体和菌株808孢子单核体为受体杂交获得的40个杂交菌株进行SCAR-PCR鉴别，并采用传统镜检和拮抗测试方法进行验证。【结果】筛选出分别标识供体菌株YX7两个细胞核核型的特异性条带a和b，据此设计的SCAR引物PA和PB分别对供体菌株YX7的2个不同细胞核具有特异性扩增作用。SCAR-PCR鉴定结果显示，40个待测菌株中，27个菌株为杂合子，其中19个菌株具有a条带标识核型，8个菌株具有b条带标识核型；13个菌株为非杂合子，其中11个菌株同时具有条带a和b标识的两个核型，是菌株YX7本身，另外2个菌株两种核型均未被检测出，属于菌株808的孢子单核体。传统方法验证结果与SCAR分子标记鉴定结果完全一致。与传统方法相比，SCAR标记方法更简便高效、结果更稳定可靠，并可通过核型标识进一步将杂合子分为两组。【结论】SCAR分子标记能高效、全面和精准鉴别香菇双单杂交菌株的杂合子和非杂合子，可应用于香菇杂交分子辅助育种和遗传分析。
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