碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究

廖思明; 王青艳; 刘筱梦; 黄日波; 《生物技术通报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：将已克隆的碱性α-淀粉酶基因信号肽编码序列去除,用PCR的方法加入酶切位点,然后与表达载体pHIS1525连接转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-JH,并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌YYBm1原生质体,获得基因工程菌YYBm1-pHIS1525-JH。SDS-PAGE分析表明该基因在巨大芽孢杆菌中得到了有效表达。酶学性质研究表明,该酶的最适温度与pH值分别为60℃与pH8.5,在pH7.0-10.5之间具有较好的稳定性,Km值为1.94 mg/mL,酶活力可达2 516.5 U。

关键词： 碱性α-淀粉酶 巨大芽孢杆菌 芽孢杆菌表达系统 基因表达 酶学性质