科研产出
李树炭疽病病原果生刺盘孢特异性PCR检测
《植物病理学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：果生刺盘孢(Colletotrichum fructicola)是引起李树炭疽病的优势病原菌,属于胶孢刺盘孢复合群(C.gloeosporioides species complex).本研究对该复合群中36个菌株的ApMat序列进行比对,进而根据C.fructicola特异性位点设计了 1对针对该菌的特异性引物:F2(5'-CGTGACCCAGGAGGCGACCACGCATCTGT-3')和 R2(5'-GGTGATCTCCTAGCGTTCG-TACGTCTAAT-3'),在此基础之上建立了 PCR检测体系.结果表明,引物F2/R2可从C.fructicola基因组DNA中扩增出长度为132 bp的特异性目的条带,检测灵敏度达100 fg·μL-1.利用该检测体系可从人工接种C.fructicola HN47-2菌株的李树叶片以及田间自然染病的李树叶片样品中快速检测出目标条带.本研究针对C.fructicola建立的灵敏、快速的特异性PCR检测方法为该菌引起的李树炭疽病的田间早期诊断、动态监测和精准防控提供了重要的技术支撑.
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广西红花檵木炭疽病病原鉴定及其生物学特性
《西南农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确广西地区红花檵木（Loropetalum chinense var.rubrum）炭疽病病原菌的分类地位和生物学特性，为该病害的正确诊断及科学防治提供理论依据。【方法】采用组织分离法分离红花檵木病叶的病原菌，通过活体接种法确定其致病性，结合形态学特征和多基因序列[核糖体转录间隔区（ITS）、肌动蛋白（ACT）、β-微管蛋白（TUB2）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、几丁质合酶（CHS-1）和钙调蛋白（CAL）]分析，确定引起红花檵木炭疽病的病原菌。采用菌落生长速率法测定不同温度、pH、碳源、氮源和杀菌剂对病原菌菌丝生长的影响。【结果】从广西红花檵木炭疽病病叶组织中分离获得6株形态一致并具有致病性的真菌菌株，菌落近圆形，中部灰色至深灰色，边缘灰白色，气生菌丝体疏松、絮状，分生孢子单细胞、长椭圆形，与果生刺盘孢（Colletotrichum fructicola）形态一致。对代表性菌株H6的ITS、ACT、TUB2、GAPDH、CHS-1和CAL基因序列进行PCR扩增，并在NCBI中进行BLAST比对分析，发现这些序列与多个果生刺盘孢菌株的序列同源性达99%～100%。使用这些基因序列构建多基因系统发育进化树，发现菌株H6与果生刺盘孢聚于同一最小分支，因此确定红花檵木炭疽病病原菌为果生刺盘孢。生物学特性测定结果表明，最适宜菌株H6菌丝生长的温度为28.0℃,最适pH为8.0,最适碳源和氮源分别为木糖醇和L-脯氨酸；对菌株H6菌丝生长有较强抑制效果的杀菌剂有吡唑醚菌酯、啶氧菌酯、乙蒜素、多菌灵和咪鲜胺。【结论】结合形态学与分子生物学鉴定方法，将广西地区红花檵木炭疽病的病原菌鉴定为果生刺盘孢（C.fructicola）,明确了最适宜该病原菌生长的温度、pH、碳源和氮源等条件及对该病原菌具有较强抑制效果的几种杀菌剂。
关键词： 红花檵木 果生刺盘孢 炭疽病 多基因系统发育 广西
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