科研产出
红麻线粒体基因atp6过表达载体的构建与转化
《西南农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:【目的】构建红麻线粒体基因atp6过表达载体遗传转化体系,为红麻线粒体基因的遗传转化及功能研究打下基础。【方法】以红麻UG93A花药cDNA为模板,通过同源克隆技术克隆atp6基因编码区(CDS)的全长序列;利用In-Fusion基因融合技术构建植物过表达载体,通过农杆菌介导法转化野生型烟草,并对转基因阳性烟草植株进行抗性筛选和PCR验证。【结果】红麻UG93A的atp6基因CDS全长为1182 bp,成功构建红麻atp6基因全长过表达载体pBI121-atp6-EGFP,并获得4株转基因烟草植株(B1、B2、B3和B4),使用过表达载体上3对不同位点的引物组合对转基因植株进行PCR验证,发现有2株转基因烟草植株在3对不同引物中稳定表达,即获得2株含pBI121-atp6-EGFP的T_0代转基因阳性植株(B1和B2)。【结论】构建的红麻线粒体基因atp6过表达载体遗传转化体系,可用于指导后续atp6基因调控红麻细胞质雄性不育(CMS)分子机理研究。
关键词: 红麻 细胞质雄性不育(CMS) atp6基因 过表达载体 转化
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果蔗中氯虫苯甲酰胺残留检测方法研究
《现代农药 》 2017
摘要:建立了果蔗中氯虫苯甲酰胺残留的气相色谱检测分析方法。样品中氯虫苯甲酰胺用乙腈提取后将其转化为IN-EQW78,再经萃取,弗罗里硅土柱进一步净化后进行GC-μECD检测。结果表明:在0.01~1.0 mg/L质量浓度范围内,氯虫苯甲酰胺呈良好的线性关系(R~2为0.999 9)。在添加浓度为0.02~2.0 mg/kg时,蔗茎中氯虫苯甲酰胺回收率为84.05%~104.73%,相对标准偏差为3.67%~7.75%;蔗叶中回收率为77.99%~99.22%,相对标准偏差为1.50%~8.63%。该方法灵敏,精密度和准确度高,杂质干扰少,成本低,符合农药残留测定方法要求。
关键词: 果蔗 氯虫苯甲酰胺 转化 IN-EQW78 气相色谱 残留
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影响农业科技成果转化的因素分析及对策
《现代园艺 》 2014
摘要:在介绍了农业科技成果特点的基础上,对农业科技成果本身的质量、农业推广体系以及农民对农业科技成果的需求3个方面进行了详细分析,将成果转化的影响因素进行了说明,并根据分析结果提出了农业科技成果转化的对策:一是转变农业科技研究管理,提高农业科技成果本身的质量;二是推动农业科技成果推广办法的改革和创新;三是刺激市场发展,提高农民对农业科技成果的需求。
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中华猕猴桃华优遗传转化系统建立研究
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:为了更好的利用遗传转化技术进行猕猴桃品种改良研究,以中华猕猴桃华优组培苗幼嫩叶片为材料,研究了外植体分化不定芽再生途径所需的培养条件及转化效率提高方法。结果表明,在叶片不定芽诱导培养基中加入浓度为0.75~1.0 mg/L的TDZ时,叶片愈伤发生率达85.7%~90.1%,不定芽发生率达41.8%~44.6%;在TDZ 1.0mg/L基础上,补充0.1~0.4 mg/L IAA可使叶片愈伤发生率提高到96.7%~100%,不定芽发生率提高到67.4%~71.9%;在农杆菌侵染液与共培养基中同时加入75~100μmol/L浓度的AS,可使GUS瞬时表达率及卡那抗性芽发生率分别提高至27.9%、14.5%;外植体被农杆菌侵染前,的预培养2~3 d有利于提高GUS表达率与卡那抗性芽发生率。GUS染色与PCR扩增检测结果显示,Shiva A基因已转化至中华猕猴桃华优转基因植株。
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农杆菌介导的葡萄柚转化再生体系建立研究
《南方农业学报 》 2013 CSCD
摘要:【目的】建立邓肯葡萄柚上胚轴遗传转化再生体系,为葡萄柚基因转化研究奠定基础。【方法】以邓肯葡萄柚上胚轴为外植体,研究上胚轴不定芽和生根诱导、遗传转化的影响因子。【结果】在添加TDZ0.50~1.00mg/L的培养基上,上胚轴不定芽诱导率为72.7%~81.6%;无菌枝条的最适生根条件为1/2MT添加ABT6号1.0mg/L,生根率可达81.3%。不同抗菌素中,以替门汀杀菌效果较好,且对外植体出芽无明显抑制作用。转化芽选择初期,5~7d的暗培养有利于卡那霉素抗性芽的诱导发生。PCR检测结果显示,7株抗性植株中有6株呈阳性。【结论】建立了邓肯葡萄柚上胚轴植株再生繁殖体系,为其基因转化奠定了基础。
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农杆菌介导AFT基因转入四季桔的研究
《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:以四季桔上胚轴为外植体,研究农杆菌介导转化过程中的影响因素。结果显示,转化研究所用抑菌剂抗菌素中,替门的汀杀菌效果较好,且对外植体出芽无明显抑制作用。转化芽选择初期,2~3 d的预培养及选择培养初期3~5 d的暗培养有利于卡那霉素抗性芽的发生。PCR扩增检测结果显示,AFT基因已转化至四季桔,转基因植株-4℃处理6 d时,SOD酶与脯氨酸含量均高于对照。该试验建立了四季桔上胚轴遗传转化再生系统,其再生条件为:MT基本培养基附加TDZ0.5~1.0 mg/L,替门汀300 mg/L,卡那霉素100 mg/L;预培养时间为2~3 d,共培养后3~5 d的暗培养有利于转化率的提高。
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免耕和稻草还田对稻田土壤氮素转化强度的影响
《土壤通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:为了明确土壤氮素转化对免耕和稻草还田的响应,研究了不同耕作对土壤(0~5 cm、5~12 cm和12~20 cm土层)氮素转化强度和铵态氮含量的影响。结果表明,免耕显著提高0~5 cm土层土壤氨化强度和铵态氮含量,但对于5~12 cm和12~20 cm土层趋势则相反;各土层土壤硝化势、反硝化强度免耕明显低于常耕,表明免耕促进0~5 cm土层有机氮的氨化作用和降低5~20 cm土层有机氮的氨化及0~20 cm土层土壤硝化-反硝化损失。稻草还田对土壤氮素转化强度的影响因耕作而异,免耕下,稻草还田促进5~20 cm土层土壤氨化强度及各土层反硝化强度和铵态氮含量,对0~5 cm土层土壤氨化强度和各土层土壤硝化势影响不大;常耕下,稻草还田降低5~20 cm土层铵态氮含量和硝化势,提高各土层氨化强度和反硝化强度。因而,免耕结合稻草还田更有利于土壤氮素的释放、供应,但需注意防止反硝化损失。
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媒体宣传在农业科技成果转化中的推动作用分析——以广西农业科学院为例
《南方农业学报 》 2011 CSCD
摘要:【目的】探讨媒体宣传在农业科技成果转化中的作用,为制定科技成果转化方案提供参考。【方法】从微观角度分析媒体宣传对香蕉组培苗推广、甘蔗新品种和新技术的成果转化及南方葡萄一年两收栽培技术推广的影响。【结果】在现有条件的基础上,加强利用媒体宣传,可以充分发挥新闻媒体覆盖面广、传播速度快的特点,普及农业科技知识,提高农民科技文化素质,从而加快农业科技成果转化速度。【建议】科技宣传应以事实为基础,坚持报道的科学性,维护媒体公信力;科技新闻报道应做到通俗易懂,让农民易于接受;科技新闻应具有时效性,对最新的科技成果应及时进行报道,以体现科技成果的价值。
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