科研产出
基于gyrB基因鉴定分析污染中药的芽孢杆菌
《中国药学杂志 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：目的 鉴定分析污染中药的芽孢杆菌种类。方法 筛选更适用于gyrB基因扩增条件的反应体系，并对污染中药制剂、中药材、饮片和中药提取物的芽孢杆菌进行测序，通过对比基因序列和构建系统发育树分析污染菌的种类和同源性。结果 枯草芽孢杆菌是各类样品中最常见的污染菌，其次为贝莱斯芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌等，并检出条件致病菌蜡样芽孢杆菌；gyrB基因对芽孢杆菌各种、亚种具有较好的分辨力，能够有效区分同一种污染菌在不同生产企业间的菌株亲缘关系，并呈现来源的相关性。结论 为保证中药产品的质量和安全性，生产企业需加强从生产过程的源头控制原辅料带来的污染，根据中药品种的特性选择适宜的灭菌工艺。
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产挥发性物质芽孢杆菌对芒果炭疽菌的抑制作用及对芒果炭疽病的防病效果
《植物病理学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本研究从健康的芒果表皮分离得到10株对芒果炭疽菌具有抑菌活性的菌株,通过形态学观察、生理生化测定和分子生物学鉴定,6株菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),3株菌株被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens),1株菌株被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis).采用平板对峙法和平板对扣法测定了 10株芽孢杆菌的抑菌活性,结果表明,供试的10株菌株的发酵液和挥发性物质对芒果炭疽病菌均具有一定抑制作用,其中菌株N-16-2的抑制效果最好,其发酵液和挥发性物质抑菌率均达79%以上.在干燥器中测定了 10株拮抗细菌产生的挥发性物质对芒果采后炭疽病的防治效果,结果表明,10株菌株对芒果采后炭疽病的防病效果均在60%以上,其中菌株YM-11-C对采后炭疽病的防效最佳,高达70%.采用固相微萃取气质联用测定细菌产生的挥发性物质的成分,结果表明,10株拮抗细菌挥发性物质成分主要为以下 6 种化合物,Diethyl Phthalate,Hexanedioic acid,bis(2-ethylhexyl)ester,Butylated Hydroxytoluene,Squalene,2-Dodecan-one,2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione,2,6-bis(1,1-dimethylethyl)-,对这 6 种挥发性化合物进行抑菌活性测定,结果表明 Dieth-yl Phthalate,2-Dodecanone 和 2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione,2,6-bis(1,1-dimethylethyl)-这 3 种化合物具有明显抑菌活性,其中化合物2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione,2,6-bis(1,1-dimethylethyl)-对芒果炭疽菌的抑制效果最好.本研究是首次报道枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌产生的挥发性物质对芒果炭疽菌的抑制作用和对芒果炭疽病防病效果,也是首次报道化合物2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione,2,6-bis(1,1-dimethylethyl)-对芒果炭疽菌的抑制作用和对芒果炭疽病防病效果.
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生物有机肥、枯草芽孢杆菌对木薯生长及土壤性状的影响
《广东农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]通过大田试验,研究生物有机肥(BF)、枯草芽孢杆菌(BS)、缓释氮肥(SRN)对木薯生长和土壤养分、酶活性等的影响.[方法]试验设置不同生物有机肥(BF)施用量(BF1,5 t/hm2;BF2,10 t/hm2)、不同枯草芽孢杆菌菌剂(BS)浓度(BS100,100倍稀释;BS200,200倍稀释)、SRN及减肥处理(75%CF)、尿素处理(1次施用,UN1;2次施用,UN2)等组合共13个处理.[结果]BF2+75%CF处理比BF2+SRN处理显著(P<0.05)降低了土壤碱解氮含量;在施用SRN情况下,BS100处理显著提高土壤速效钾含量;BF2在施尿素时显著提高土壤速效钾含量;BF2+75%CF处理比SRN显著提高土壤速效钾含量.BS+SRN、BF+SRN、BF2+75%CF处理均比SRN显著提高土壤微生物生物量碳.在施用SRN的情况下,BS100、BF2处理显著提高土壤酸性磷酸酶活性.SRN、UN2处理木薯产量分别比UN1处理显著提高20.5%和21.7%,BS和BF处理在施尿素或SRN情况下均能显著提高木薯产量.相比常规施肥,BF和BS配合减肥或缓释氮肥可提高氮肥利用率(10.9%~21.5%)和钾肥利用率(11.4%~28.9%).[结论]缓释氮肥1次施用与尿素2次施用的增产效果相当.在施用SRN的情况下,BF提高了土壤蔗糖酶活性、BS提高了土壤速效钾含量,二者均提高SMBC、酸性磷酸酶活性、木薯产量.在减施化肥的情况下,BF可提高土壤速效钾含量、SMBC、木薯鲜薯产量.BF、BS处理均可提高木薯氮、钾肥利用率.
关键词： 生物有机肥 枯草芽孢杆菌 肥料利用率 缓释氮肥 减施化肥
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生物菌肥对香蕉枯萎病的防治效果研究
《农业研究与应用 》 2019
摘要：开展含枯草芽孢杆菌的生物菌肥在大田种植中不同施用时期对香蕉枯萎病防控效果的对比试验。试验表明,施用枯草芽孢杆菌生物菌肥有益健壮植株,有效降低枯萎病发生情况及病级,对土壤中的病原菌也有明显的抑制作用。在营养生长期施用菌肥对枯萎病的防控效果最好,其次是孕蕾期,再次是果实发育期,不施用菌肥处理枯萎病发生情况最严重。
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中温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达及其发酵条件优化
《食品与发酵工业 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以枯草芽孢杆菌为表达系统,以中温α-淀粉酶为目标蛋白,研究了启动子和信号肽对外源蛋白表达分泌的影响。分别选取了4种启动子以及8种信号肽来进行筛选,结果表明,启动子PApr E的强度最高,信号肽SPnpr E的分泌效率最好。针对重组菌株1A751Q31进行系统的发酵优化,在72 h发酵液中α-淀粉酶酶活达到380U/m L。在7.5 L发酵罐中进行放大实验,发酵液中α-淀粉酶酶活最高达到853 U/m L。以上研究表明,α-淀粉酶适合在枯草芽孢杆菌中进行表达,同时表明枯草芽孢杆菌是良好的异源蛋白表达系统。
关键词： 枯草芽孢杆菌 α-淀粉酶 启动子 信号肽 发酵优化
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重组枯草芽孢杆菌发酵廉价原料生产普鲁兰酶
《生物技术 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：[目的]构建长野芽孢杆菌普鲁兰酶突变体枯草芽孢杆菌工程菌株,优化发酵条件,筛选廉价的培养基原料生产普鲁兰酶。[方法]利用分子生物学手段,将基因pul324和表达载体p WB980连接,构建表达质粒p WB-pul324并转化Bacillus subtilis WB600;对表达产物进行SDS-PAGE分析和初始酶活的测定。进一步优化发酵条件,对不同碳源和氮源进行发酵培养基的筛选,同时研究不同金属离子的添加和培养基初始p H、接种量对发酵产酶的影响。[结果]获得基因工程菌B.subtilis WB600/p WB-pul324,SDS-PAGE电泳结果显示在89 k Da处有特异性条带,发酵初始酶活为12.34 U/ml;筛选得到玉米淀粉水解液和玉米浆干粉为培养基最适碳源和氮源,其最适浓度分别为50 g/L和30 g/L。Mn~(2+)、Fe~(3+)、Fe~(2+)和Tween-80的添加能提高发酵产酶活力。在最适初始p H 6.5,以最适5%接种量接种于优化后的培养基中,摇瓶发酵80 h普鲁兰酶的酶活达到414.48 U/ml。[结论]实现了普鲁兰酶突变体在枯草芽孢杆菌中的高效表达,筛选获得的培养基主要原料经济低廉,经过发酵条件优化后,重组菌酶活达到414.48 U/ml,是之前研究结果(20.16U/ml)的20倍。
关键词： 普鲁兰酶 长野芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 玉米淀粉水解液 玉米浆干粉 发酵条件优化
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枯草芽孢杆菌9A与4种药剂混配对杧果炭疽病防控研究
《南方园艺 》 2015
摘要：【目的】研究枯草芽孢杆菌9A专利菌株与4种化学药剂混配协同控制杧果炭疽病作用,为田间防治杧果炭疽病提供适合的混配剂量,以减少化学农药使用量。【方法】将稀释2 000倍咪鲜胺、嘧菌酯、吡唑醚菌酯及稀释1 000倍多菌灵与5%和10%9A混合,分别在室内平板、离体叶片、果实上测定其抑菌活性,并进行田间防控试验。【结果】枯草芽孢杆菌9A在与4种化学药剂混合后,其菌体生长虽受到一定的抑制,但混合液的抑菌活性显著提高。离体叶片和离体果实试验结果表明,10%验9A与稀释2 000倍咪鲜胺、嘧菌酯、吡唑醚菌酯及稀释1 000倍多菌灵混合后,处理叶片的防效分别为66.67%、75%、83.34%和53.34%,处理果实的防效分别可达80%、75%、75%和60%,均显著高于单一化学药剂处理及菌液处理。田间试验结果表明,稀释2 000倍嘧菌酯、咪鲜胺、吡唑醚菌酯和稀释1 000倍多菌灵4种药剂和10%9A混合液处理的防治效果分别为70.36%、64.37%、77.67%和62.06%,与单一药剂相比分别提高27.20%、14.69%、27.10%和20.10%。【结论】枯草芽孢杆菌9A与化学药剂混配可有效防治杧果炭疽病,其防效均显著高于单一化学农药处理及单一菌液处理,可以减少化学农药的使用量。
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枯草芽孢杆菌9A对杧果炭疽菌的抑菌作用及防病效果
《果树学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】枯草芽孢杆菌9A分离自瓜类白粉病病叶病斑处,为探讨其防病利用价值,【方法】测试了其培养滤液对杧果炭疽菌菌丝生长、菌丝膜透性、产孢量、孢子萌发、附着胞形成的影响,以及其培养液在室内和果园里对杧果叶片炭疽病的防病效果。【结果】含9A培养滤液浓度10%时菌丝生长抑制率为91.86%,孢子的产生受到促进作用;当浓度达1.5%时,附着胞不能黑化,达4%时,孢子不能萌发;9A培养滤液可以提高杧果炭疽菌菌丝的膜透性,培养至36 h左右时膜透性最大;接种后24 h时以9A培养液处理,室内离体叶片上的防效为0,果园嫩梢上的防效是40.55%;处理9A培养液后24 h时接种,室内离体叶片上的防效是100%,果园嫩梢上的防效是82.04%。【结论】枯草芽孢杆菌9A在杧果炭疽病的防治中具有潜在的利用价值。
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