科研产出
厌氧梭菌表达载体在大肠杆菌中的直接表达及活性筛选
《应用与环境生物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：厌氧微生物的代谢途径改造、重组基因表达等分子生物学操作步骤多,易造成氧气接触,从而导致厌氧微生物死亡.针对厌氧梭菌-大肠杆菌穿梭载体的构建和筛选问题,利用纤维素内切酶基因Cphy3367作为报告基因,分析穿梭载体的硫解酶启动子在大肠杆菌中启动基因转录表达的可能性.含有重组质粒pSOS95-Cphy3367的大肠杆菌菌株相对于对照菌株生长迟缓,生物量降低.实时定量PCR检测及重组蛋白酶活检测结果中,发现硫解酶启动子在大肠杆菌中能启动基因转录表达,在37℃温度下48 h后达到高峰.表明硫解酶启动子在大肠杆菌中可以被宿主识别和启动基因表达,基因可以翻译成为蛋白质.在厌氧梭菌的穿梭载体构建中,含有硫解酶启动子的载体可以在大肠杆菌中进行重组载体的活性筛选这个步骤,从而降低梭菌厌氧操作的复杂度和难度.
关键词： 厌氧梭菌 硫解酶启动子 大肠杆菌 重组表达 纤维素酶 菌株筛选
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水葫芦生防菌的分离筛选及初步鉴定
《南方农业学报 》 2013 CSCD
摘要：【目的】分离筛选对水葫芦具有强致病性菌株,为水葫芦生物防治奠定理论基础。【方法】利用组织分离法,从自然发病水葫芦叶片上分离获得对水葫芦有强致病性的菌株并纯化培养;用玻片保湿法观察菌株分生孢子与分生孢子梗形态特征;根据柯赫氏法则对自然发病与接种叶片发病情况进行验证对比;通过查阅《真菌鉴定手册》对菌株进行形态学鉴定。【结果】经组织分离法提取纯化得到菌株BG11,该菌在PDA上生长较好,菌落紧密,表面灰白色,呈绒毛状;分生孢子合轴产生,2~5个分生孢子着生在分生孢子梗上,分生孢子为短圆柱形,单胞无色,有油球,长度为12.50~17.50μm,大多数为13.75~17.00μm,宽度为4.50~5.50μm;将BG11菌株接种到健康水葫芦叶片上表现为自然发病叶片类似症状,且两者分生孢子梗及分生孢子形态一致。【结论】初步鉴定BG11菌株为水葫芦炭疽菌Colletotrichum sp.,对水葫芦具有强致病性。
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苦瓜抗白粉病SRAP标记筛选的PCR体系优化与验证
《南方农业学报 》 2013 CSCD
摘要：【目的】优化苦瓜抗白粉病SRAP标记的PCR体系,为获得苦瓜抗白粉病的SRAP分子标记、加快苦瓜抗白粉病新品种的选育提供参考。【方法】采用正交设计L16(45),在已有SRAP-PCR扩增程序基础上,以苦瓜抗、感白粉病的父母本及其杂交后代基因组DNA为模板,用4对SRAP引物对模板DNA、dNTPs、Mg2+、引物、TaqDNA聚合酶等5个因素浓度进行优化组合和验证。【结果】提取的苦瓜基因组DNA纯度较好,无蛋白质、RNA等物质污染,其纯度和完整性较好。利用引物对ME9-EM11进行PCR扩增,16个不同因素组合处理在苦瓜父本MC18和母本MC1-2的基因组DNA间的扩增结果有明显差异,其中以处理3的SRAP-PCR体系(20.0μL:DNA5.0ng/μL、dNTP0.05mmol/L、Mg2+2.5mmol/L、引物0.6μmol/L、TaqDNA聚合酶0.088U/μL)获得较清晰、较多的扩增条带。用4对引物对验证优化的SRAP-PCR体系,其重复性好,不同苦瓜材料间无明显的多态性。【结论】优化的SRAP-PCR体系适用于苦瓜抗白粉病SRAP分子标记的筛选。
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大豆新品种桂春12号的选育及栽培技术
《南方农业学报 》 2013 CSCD
摘要：【目的】为适应生产上大豆种植模式的变化,以高产、适合间套种为主要目标,选育大豆新品种。【方法】以高蛋白优良春大豆品种桂豆3号为母本,外引材料巴西大豆高产种质MG/BR-56为父本,通过有性杂交,选育株高适中、产量潜力大、抗性强、品质好、适应性广,既适合清种,也适合间套种的大豆新品种。【结果】经多代系谱选育,品系命名为桂807。桂807 3年3造区域试验平均产量2585.25 kg/ha,比对照桂春1号增产1.7%,居9个参试种第2位,产量幅度1725.00～3199.95 kg/ha。3年3造参试17点次中有9点次比对照增产,占参试点次的52.9%。在间种条件下也有良好表现,平均产量1569.86 kg/ha,比对照增产20.91%,增产效果显著。2011年通过广西农作物品种审定委员会审定,定名为桂春12号。【结论】桂春12号具有产量潜力大、抗性强、品质好、适应性广等特点,既适合清种,也适合与甘蔗、木薯间套种,适宜在桂南、桂中等地区推广种植。
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高糖高产甘蔗新品种桂糖38号的选育
《中国糖料 》 2013
摘要：为在广西推广应用高产高糖甘蔗新品种,解决生产上品种结构过于单一的问题,以桂糖73-167为母本,CP84-1198为父本进行甘蔗有性杂交育种,采用"五圃制"选育程序,经过区域试验和生产试验育成了目标品种桂糖38号。广西区试结果表明,桂糖38号平均产蔗量96.3t/hm2,较对照新台糖22增产4.3%,其中宿根平均产蔗量为100.9t/hm2,比新台糖22号增产11.5%;11—2月份平均蔗糖分为14.95%,比新台糖22高0.93个百分点,其中11月和12月的平均蔗糖分分别为13.76%和15.14%,比新台糖22分别高0.84和1.21个百分点;新宿平均含糖量为14.4t/hm2,比新台糖22增11.6%,其中宿根平均含糖量为15.1t/hm2,较新台糖22增17.1%。桂糖38号为早熟、高糖、高产、宿根性好、适应性广的优良甘蔗品种,可在广西中等以上肥力的旱地和水田推广种植。
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甘蔗新品种桂糖34号的选育
《中国糖料 》 2013
摘要：桂糖34号是按"五圃制"常规杂交育种方法经过9年选育而成的甘蔗新品种,比较适合广西旱坡地种植。该品种高产稳产,在广西区域试验中,平均蔗茎产量为112.80 t/hm2,比对照种新台糖16号、新台糖22号分别增产20.82%、11.00%;宿根性好,宿根蔗发株率达196.64%,比新台糖16号高47.66个百分点,比新台糖22号高53.27个百分点;耐旱性较强,在没有灌溉条件的旱地种植,产量最高达107.84t/hm2,比新台糖16号和新台糖22号增产,增幅最高达44.7%。
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春大豆新品种桂春豆104的选育及高产栽培技术
《南方农业学报 》 2013 CSCD
摘要：【目的】选育抗逆性好、适应性广、高产、优质、适合广西间套种种植的春大豆新品种,为广西大豆产业发展提供支持。【方法】采用杂交育种方法,选用桂春1号为母本、桂早一号为父本进行有性杂交,经系谱法选育而成,逐年参加品比、区试及生产试验,并进行性状观察、品质鉴定及配套栽培技术研究。【结果】育成的大豆新品种桂春豆104,表现早熟、高产、优质、适合间套种栽培,区试平均产量为2685.0 kg/ha,生产试验平均产量为2878.8 kg/ha,分别较对照品种增产3.3%和5.7%;粗蛋白平均含量39.25%,粗脂肪平均含量21.23%;抗病性和耐旱性强,适应性广。2012年通过广西农作物品种审定委员会审定。【结论】桂春豆104可在广西作春大豆种植,适合间套种。
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