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基于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的菜心SCoT分析

《亚热带植物科学 》 2020

摘要:以菜心(Brassica rapa var. parachinensis)抗小菜蛾品种Caixin65和感小菜蛾品种Caixin69及6份F2株系为材料,利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测菜心抗虫株系的SCoT多态性,同时进行SCoT多态性的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测效率、遗传多样性分析和差异条带克隆分析。结果表明,非变性聚丙烯酰胺凝胶能检测出亲本与子代间的SCoT多态性和遗传多样性变化,条带数量较多且清晰,提高了SCoT标记检测效率。选取亲本的10条非变性聚丙烯酰胺凝胶差异片段克隆测序,获得感虫序列4条、抗虫序列6条,GENSCAN预测其中8条具有启动子、终止子、阅读框等基因结构序列。同源性检索分析表明,感虫序列分别与泛素羧基末端水解酶mRNA序列、大白菜克隆序列、白菜线粒体丙酮酸载体蛋白序列、甘蓝基因组编码未知蛋白的HDEM序列同源,抗虫序列分别与白菜RNA假尿苷合酶4线粒体mRNA序列、京水菜线粒体DNA序列、白菜未知蛋白mRNA序列、白菜4-香豆酸:辅酶A连接酶mRNA序列、大白菜克隆序列、哈茨木霉mRNA序列同源。本研究提高了SCoT标记清晰度、遗传多样性检测水平和差异片段克隆的精准性,使得SCoT成为批量克隆差异片段的高效工具,有助于挖掘SCoT功能性标记信息,开展初步的功能基因组学研究,提高优异株系筛选鉴定效率,加快育种进程,为菜心抗虫性机制的进一步研究提供理论基础。

关键词: 菜心 抗虫性 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 SCoT分析

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水稻抗细菌性条斑病主效基因位点的遗传分析及定位

《西南农业学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:【目的】发掘抗水稻细菌性条斑病(BLS)的主效基因,丰富水稻抗病基因位点数量,为水稻抗细菌性条斑病的分子标记辅助选择提供参考依据。【方法】以高抗细菌性条斑病的国际稻品种BJ1与高感细菌性条斑病的本地优质稻品种油占8号为亲本,构建包含251个F_2代单株的定位分离群体,根据不同世代群体对细菌性条斑病的抗性反应分析BJ1的抗性遗传特性;采用混合分组分析法(BSA)结合SSR分子标记对抗性基因进行初步定位,用OriginPro 9.1分析F_2代群体基因型与表型的相关性。【结果】所有BJ1×油占8号的F_1代植株对水稻细菌性条斑病均表现高感或感病,表明BJ1的抗性属于隐性性状;F_2代群体中抗病单株数与感病单株数分别为66和185株,基本符合1∶3 (χ~2=0.19<χ■=3.84)的理论分离比例,表明抗源BJ1的抗细菌性条斑病符合单基因遗传模式。SSR分子标记引物RM 258在抗、感DNA池间呈多态性,其扩增F_2代群体的带型与接种鉴定表型符合率达93.0%,基因型与表型显著相关(P<0.05,相关系数为0.5705)。对照已公布的水稻分子遗传连锁图,可知RM 258位于第10号染色体上约48.8 cM处。【结论】水稻细菌性条斑病抗源BJ1的抗性受位于第10号染色体上约48.8 cM处的1对隐性主效基因控制,推测是一个新的抗BLS基因位点。

关键词: 水稻 细菌性条斑病 抗性 遗传分析 基因定位

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香蕉MaWRKY28基因的克隆及其功能分析

《分子植物育种 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探究香蕉WRKY28基因响应Foc-TR4侵染的作用及调节机制,本研究从抗病'桂蕉9号'品种中克隆了香蕉MaWRKY28基因;利用ExPASy、MEGA 6.0等软件对其蛋白序列进行理化性质分析及系统进化树的构建;采用q RT-PCR分析了该基因在抗('桂蕉9号')、感('威廉斯')香蕉品种受Foc-TR4侵染不同时间后的表达量变化;构建过表达MaWRKY28基因载体,转化拟南芥,并检测该基因在转化植株中的表达量.结果表明,从'桂蕉9号'中克隆了一个WRKY28基因,命名为MaWRKY28 (GenBank登录号为MK941141).MaWRKY28基因编码区全长999 bp,编码332个氨基酸,属于不稳定的分泌蛋白,具有典型的WRKY结构域;系统进化树分析表明,香蕉与海枣(Phoenix dactylifera)、油棕(Elaeis guineensis)的同源性最高,相似性高达87%;qRT-PCR结果显示,在Foc-TR4侵染的香蕉根系过程中,MaWRKY28基因呈上调表达趋势,且在抗病品种中的表达量整体高于感病品种;筛选获得的7株阳性转化拟南芥植株中,MaWRKY28基因的相对表达量较野生型均显著提高.综上说明,MaWRKY28基因在香蕉抗枯萎病菌侵染过程中参与了抗病相关过程,且能在异源受体拟南芥中成功转化并高效表达.本研究结果为进一步研究香蕉抗病品种的抗性机理提供了帮助.

关键词: 香蕉(Musa acuminata) MaWRKY28 抗病性 转基因

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黑穗病菌1号生理小种致病力及甘蔗杂交材料的抗性评价

《广西糖业 》 2020

摘要:通过比较黑穗病菌1号生理小种与混合孢子粉的致病性,并评价103份甘蔗材料对黑穗病菌1号生理小种的抗性,为甘蔗黑穗病菌生理小种的深入研究及甘蔗优良抗病品种的选育提供科学依据.结果表明,在致病力测试的10份材料中,黑穗病菌1号生理小种对4份材料的致病力较混合孢子粉降低,抗性等级提高1~2级,对2份材料的致病力提高,抗性等级均下降2级,两种接种体对其余4份材料的致病性均表现完全一致.抗性评价的103份甘蔗材料中,43份不发病,60份材料的发病率为1.32%~30.06%,其中感病4份,中感10份,中抗5份,抗27份,高抗14份.发病率最高的是桂糖11-80,平均发病率为30.06%,重复最高发病率为44.74%.引起桂糖42号和LC05-136黑穗病的病原可能是2号小种.部分材料对黑穗病的抗性产生不同程度分化.黑穗病潜伏期为57~146d,发病率较高(10%以上)的甘蔗材料黑穗病潜伏期主要集中在57~93d.对黑穗病发病率与潜伏期的相关性进行分析表明,潜伏期越长,甘蔗材料对黑穗病菌的抗性越好.统聚类分析的结果与参试甘蔗品种的抗性表现一致.

关键词: 甘蔗黑穗病 生理小种 潜伏期 抗性评价 聚类分析

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84份木薯种质对朱砂叶螨的抗性评价

《湖南农业科学 》 2019

摘要:对广西南亚热带农业科学研究所木薯种质资源圃84份木薯种质进行朱砂叶螨抗性的评价。结果表明:84份木薯种质中,没有发现免疫和高抗朱砂叶螨的种质,朱砂叶螨抗(R)的种质6份、中抗(MR)种质39份、感性(S)种质31份、高感(HS)种质8份。其中,桂垦09-11、SC5等6份种质可作为抗性的育种材料,广西种植面积较大的品种GR3、SC9、GR911、SC205及新选048均为中抗性。食用型木薯品种的抗性较差,其中以GR891和南亚薯1号的抗性最差。供试木薯种质的螨害指数与株型、分枝数量、裂片叶形、叶片长度、叶片宽度及叶片厚度无相关关系。

关键词: 木薯种质 朱砂叶螨 抗性评价

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2017-2018年长豇豆品种广西沿海地区区域试验

《南方农业学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要:[目的]开展长豇豆品种区域试验,为筛选适宜广西沿海地区种植的优良长豇豆品种提供参考依据.[方法]2017—2018年,在广西沿海地区合浦县对12个长豇豆品种进行品种比较试验,综合评价其主要农艺性状、产量、主要病害抗性及耐贮藏性等指标.[结果]农丰1号、农丰3号和金帅等8个长豇豆品种的单荚长在50.00~70.00 cm、单荚重在20.00~35.00 g、豆荚颜色绿白色、外观顺直且无鼓籽和鼠尾,单株荚数较多,符合外销要求;农丰1号、农丰3号、农家宝、金帅、翠宝2号和裕丰8号6个品种的平均鲜荚总产量高于对照(金豆一号),其余品种均低于对照,其中,农丰1号的总产量最高,为45093.36 kg/ha,比对照极显著增产20.18%(P<0.01,下同);抗优009号的前期平均产量最高,为25014.40 kg/ha,比对照极显著增产16.84%,丰成18号的前期平均产量(24813.15 kg/ha)较高,极显著高于对照15.90%;各品种主要病害田间发病较轻,抗性差异不明显;农丰1号、农丰3号、农家宝、金帅、翠宝2号和对照6个品种嫩荚中种子所占比例小,荚壁厚、失水较慢,属于更耐贮藏长豇豆品种.[结论]农丰1号、农丰3号、农家宝、金帅、翠宝2号和金豆一号等长豇豆品种综合表现优良,适宜在广西沿海地区大面积推广种植;抗优009号和丰成18号的前期产量及抗主要病害综合特性较佳,可作为广西沿海地区早春早熟栽培品种适当推广种植.

关键词: 长豇豆 农艺性状 产量 抗病性 耐贮藏性 广西沿海地区

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南方水稻黑条矮缩病苗期抗性的全基因组关联分析

《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD

摘要:由白背飞虱传播的南方水稻黑条矮缩病(Southern Rice Black-streaked Dwarf Virus, SRBSDV)给水稻的生产造成巨大的产量损失,开展SRBSDV抗性鉴定及全基因组关联分析,可为有效防治水稻SRBSDV提供科学依据。本研究利用人工接种方法,对419份广西地方稻种资源核心种质进行SRBSDV苗期抗性鉴定。结果表明,其SRBSDV苗期发病率变异范围为6.11%~100%,平均值为84.80%,抗性变异系数为23.29%。利用211 818个高质量SNPs对水稻SRBSDV苗期抗性进行全基因组关联分析(GWAS),共检测到10个与水稻SRBSDV苗期抗性显著相关的SNP位点,可解释7.84%~18.30%的表型变异。在所有的显著性关联SNP位点中,共检测到8个抗病基因(R基因),分别位于第1、第5及第11染色体上,可能参与SRBS-DV苗期抗性的调控。本研究结果将为水稻抗SRBSDV分子育种和抗SRBSDV基因克隆提供基础信息。

关键词: 南方水稻黑条矮缩病 核心种质 抗性 全基因组关联分析 SNP

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广西设施栽培条件下甜瓜品种对根结线虫病的抗性评价

《长江蔬菜 》 2019

摘要:分别在广西南宁和北海的设施栽培条件下,对9个甜瓜品种进行了温室盆栽抗性评价和大棚生产抗性评价。试验结果表明,不同条件下,甜瓜品种对根结线虫病的抗性有一定差异,筛选出抗病品种3个,其中天山蜜表现最好,其在2种试验条件下均表现为抗病,且抗性最为稳定,推荐应用于生产。

关键词: 甜瓜品种 根结线虫病 设施栽培 抗性评价

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瓜实蝇热激蛋白Hsp90基因克隆及表达分析

《应用昆虫学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要:【目的】热激蛋白基因Hsps在生物体抗逆性过程中具有重要的作用,本文旨在通过阐释瓜实蝇Bactrocera cucurbitae (Coquillett)热激蛋白基因Hsp90在其对环境温度适应性及抗药性过程中的功能作用,为瓜实蝇综合治理提供理论基础。【方法】采用RACE-PCR技术克隆瓜实蝇的Hsp90基因cDNA序列,利用生物信息学工具分析序列特征,并通过实时定量PCR技术分析高温胁迫、阿维菌素诱导和抗性及敏感品系中该基因的表达情况。【结果】克隆获得的瓜实蝇Hsp90基因cDNA全长2 654 bp,命名为Bc-Hsp90,GenBank登录号为KP864677,含2 145 bp的开放阅读框,编码715个氨基酸蛋白,具有HSP90蛋白家族共有模式和1个基序标签,C-末端具有MEEVD基序,属于胞质型热激蛋白。系统发育分析显示,Bc-Hsp90基因高度保守。不同高温(32-40℃)胁迫处理1 h和2 h后,瓜实蝇成虫体内Bc-Hsp90的相对表达量均显著高于对照组(26℃),并在38℃和40℃表达量最高;阿维菌素长期筛选的RS品系,Bc-Hsp90表达量是对照SS品系的2.13倍,但RS品系以LC90剂量诱导后,Bc-Hsp_(90)表达量显著下调,随着恢复时间延长其表达量逐渐升高,96 h后恢复到对照水平。【结论】推测Bc-Hsp90在瓜实蝇耐热性和抗阿维菌素过程中可能起着重要作用。

关键词: 瓜实蝇 高温胁迫 抗药性 Hsp90 表达

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2017—2018年长豇豆品种广西沿海地区区域试验

《南方农业学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要:【目的】开展长豇豆品种区域试验,为筛选适宜广西沿海地区种植的优良长豇豆品种提供参考依据。【方法】2017—2018年,在广西沿海地区合浦县对12个长豇豆品种进行品种比较试验,综合评价其主要农艺性状、产量、主要病害抗性及耐贮藏性等指标。【结果】农丰1号、农丰3号和金帅等8个长豇豆品种的单荚长在50.00~70.00 cm、单荚重在20.00~35.00 g、豆荚颜色绿白色、外观顺直且无鼓籽和鼠尾,单株荚数较多,符合外销要求;农丰1号、农丰3号、农家宝、金帅、翠宝2号和裕丰8号6个品种的平均鲜荚总产量高于对照(金豆一号),其余品种均低于对照,其中,农丰1号的总产量最高,为45093.36 kg/ha,比对照极显著增产20.18%(P<0.01,下同);抗优009号的前期平均产量最高,为25014.40 kg/ha,比对照极显著增产16.84%,丰成18号的前期平均产量(24813.15 kg/ha)较高,极显著高于对照15.90%;各品种主要病害田间发病较轻,抗性差异不明显;农丰1号、农丰3号、农家宝、金帅、翠宝2号和对照6个品种嫩荚中种子所占比例小,荚壁厚、失水较慢,属于更耐贮藏长豇豆品种。【结论】农丰1号、农丰3号、农家宝、金帅、翠宝2号和金豆一号等长豇豆品种综合表现优良,适宜在广西沿海地区大面积推广种植;抗优009号和丰成18号的前期产量及抗主要病害综合特性较佳,可作为广西沿海地区早春早熟栽培品种适当推广种植。

关键词: 长豇豆 农艺性状 产量 抗病性 耐贮藏性 广西沿海地区

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