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渗透压诱导表达重组Clostridium thermosulfurogenes β-淀粉酶基因

文献类型： 中文期刊

作者： 梁莲华 1 ; 周礼芹 2 ; 罗兆飞 3 ; 王青艳 3 ;

作者机构： 1.南宁邦尔克生物技术有限责任公司

2.广西大学生命科学与技术学院南宁发酵与酶工程技术研究中心

3.广西大学生命科学与技术学院南宁发酵与酶工程技术研究中心南宁邦尔克生物技术有限责任公司

关键词： 渗透压启动子;诱导;热硫梭菌;β-淀粉酶;表达

期刊名称： 食品与发酵工业

ISSN： 0253-990X

年卷期： 2011 年 37 卷 06 期

页码： 6-10

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以热硫梭菌Clostridium thermosulfurogenes基因组为模板,PCR扩增出β-淀粉酶基因;将该基因克隆到pET-22b(+)载体上,转入大肠杆菌BL21-SI,采用NaCl形成的高渗透压诱导表达。研究了不同诱导条件对重组菌产β-淀粉酶的影响,结果以菌体密度达到OD600为0.6,诱导剂NaCl浓度为0.6 mol/L,诱导温度为35℃最佳。重组菌以LBON为培养基分批发酵时,由于营养限制,菌体密度OD600仅为4.60,β-淀粉酶活力为118U/mL。采用pH-Stat分批补料发酵时,在菌体密度仅是分批发酵的2.35倍的条件下,得到6.12倍的产酶量,酶活力达722U/mL。重组β-淀粉酶70℃水解可溶性淀粉3h的麦芽糖转化率为62.2%,高于大麦β-淀粉酶的转化率。

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