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酵母耐铜基因CUP1改良荧光假单胞菌耐铜性研究初报

文献类型： 中文期刊

作者： 吴圣进 1 ; 何勇强 2 ;

作者机构： 1.广西农科院生物技术研究所

2.广西亚热带生物资源保护利用重点实验室

关键词： 生物修复;重金属污染;荧光假单胞菌;金属硫蛋白;CUP1基因

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2007 年 23 卷 09 期

页码： 96-99

摘要： 利用根际促生菌(PGPR)荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)等微生物的生物修复作用可治理土壤重金属污染。酿酒酵母耐铜基因CUP1编码铜金属硫蛋白(Cu-MT),对铜有很高的亲和性,可拮抗重金属铜毒性。为提高荧光假单胞菌的生物修复能力,将酿酒酵母耐铜基因CUP1克隆至荧光假单胞菌。通过引物设计,将SD序列添加至酵母耐铜基因CUP1编码序列前端,PCR扩增得到约200bp的CUP1片段,克隆至测序载体pUC19,经测序证明正确后,胶回收CUP1片段连接到具有广泛宿主范围的柯斯质粒pLAFR3上,经三亲接合转移至荧光假单胞菌AS1.1381,得到重组菌株AS1.1381/pL3CUP1。铜实验表明,重组菌株AS1.1381/pL3CUP1的抗铜能力(6mM Cu2+)显著高于AS1.1381/pLAFR3(4.5mMCu2+),重组菌株抗铜性得到提高。

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