文献类型: 中文期刊
作者: 杨天为 1 ; 黄诗宇 1 ; 张尚文 1 ; 高曼熔 2 ; 张向军 1 ; 李婷 1 ; 庾韦花 1 ; 蒙平 1 ; 石前 1 ;
作者机构: 1.广西农业科学院生物技术研究所
2.广西大学农学院
关键词: 赤苍藤;SCoT-PCR;体系优化;引物筛选
期刊名称: 中国瓜菜
ISSN: 1673-2871
年卷期: 2023 年 36 卷 001 期
页码: 48-52
收录情况: 北大核心
摘要: 笔者以24份不同来源地的野生赤苍藤种质为试验材料,采用L9(33)正交试验对赤苍藤SCoT-PCR反应体系进行优化,并通过优化后的体系进行引物筛选,结果表明,PCR体系中各因素对多态性结果的影响程度排序为DNA模板量>引物用量>2×Taq Master Mix用量.最佳反应体系(20μL)为1μL DNA模板(50 ng·μL-1)、1.2μL引物(10μmoL·μL-1)、10μL 2×Taq Master Mix和7.8μL ddH2O.通过该体系从36条SCoT引物中筛选出14条稳定性好、多态性高的引物,并确定了最佳退火温度.该体系的建立和引物的筛选将为后续开展赤苍藤种质资源收集与保护、遗传多样性研究和分子育种提供参考依据.
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