文献类型： 中文期刊
作者： 欧阳浩淼 1 ; 黄日波 2 ; 陈东 2 ; 金城 1 ;
作者机构： 1.中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室
2.广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室国家非粮生物质能源工程技术研究中心广西生物炼制重点实验室
关键词： 烟曲霉;β-葡萄糖苷酶;原核表达;酶学性质
期刊名称： 生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2013 年 29 卷 09 期
页码： 1245-1253
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 探索获得优良的β-葡萄糖苷酶基因,对实现其工业化生产具有重要意义。烟曲霉Aspergillus fumigatus基因组中含有一个bgl基因(1 752 bp),编码的蛋白约65 kDa,推测为属于糖苷水解酶家族的β-葡萄糖苷酶。将bgl基因克隆并构建了重组表达载体pGEX-bgl,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导获得表达。重组蛋白经亲和层析纯化后,以七叶苷为底物进行了酶学分析,结果表明该酶的最适温度是45℃,最适pH在5.5~6.0之间,对七叶苷的Km值为17.7 mmol/L。该酶在pH 4~7范围内稳定;70℃保温2 h后仍能保持60%的活性。金属离子和化学试剂对酶活性有不同程度的影响,Ca2+对重组酶有轻微的激活作用,而SDS可强烈抑制其活性。由于其相对于真菌来源的其他葡萄糖苷酶稳定性较高,为进一步的研究与应用奠定了基础。
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