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产纤维素酶大肠杆菌工程菌的构建和酶的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 芦志龙 1 ; 吴仁智 1 ; 陈英 1 ; 黄俊 1 ; 陆琦 1 ; 陈东 1 ;

作者机构: 1.国家非粮生物质能源工程技术研究中心非粮生物质酶解国家重点实验室广西科学院广西生物炼制重点实验室

关键词: 纤维素酶;大肠杆菌;酶活;异源表达

期刊名称: 基因组学与应用生物学

ISSN: 1674-568X

年卷期: 2019 年 006 期

页码: 2620-2626

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了使大肠杆菌(Escherichia coli)具备生产纤维素酶的能力,从铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PKC-001克隆碱性纤维素酶基因,进行密码子优化后连到载体pET-22b,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,对工程菌进行表达优化并分析纤维素酶酶活.结果表明大肠杆菌工程菌能生产分子量约39 kD的纤维素酶,在培养温度20℃、摇床转速170 r/min、IPTG终浓度0.01 mmol/L的条件下,纤维素酶的产量最大;在酸性条件下,细胞内和细胞外的滤纸酶活力(FPA)分别为5.78 U/mL和1.13 U/mL,在碱性条件下检测不到滤纸酶活.显然,重组纤维素酶仅在酸性条件下有活力.

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