酸碱滴定法优化香蕉磷脂酶A活性测定及炭疽病胁迫下其活性变化研究

陈瑜娴; 李丽; 李静; 孙健; 易萍; 黄方; 黄敏; 甘婷; 《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：植物磷脂酶A(phospholipase A,PLA)是细胞膜磷脂代谢中的关键酶，可以催化磷脂分子上多个功能基团发生裂解生成信号分子，参与调节植物生长发育以及环境和生物胁迫，具有重要研究价值。本研究主要考察底物浓度、反应温度、缓冲溶液pH、缓冲溶液体积、反应时间等多种因素对香蕉PLA催化卵磷脂水解活性的影响，从而优化磷脂酶A活性测定方法，进一步根据最佳测定条件研究炭疽病胁迫下香蕉PLA活性的变化趋势。结果表明，酸碱滴定法测定香蕉PLA活性的优化条件：反应体系pH 9，底物浓度为4 g/L，反应温度为55℃，底物为15 mL，酶粗提液为3 mL，提取缓冲液体积与果皮重量的比值（mL/g）为3，反应时间为7 h。在最优条件下对炭疽病胁迫下的香蕉果皮组织进行PLA活性测定，发现果皮的病害程度与PLA活力呈正相关，即随着病害程度加深，PLA活性增大，且远大于对照组。表明PLA活性大小可能与果实的抗性有关，随着果实病害程度加深，PLA活性增大，膜磷脂降解，细胞膜的完整性被破坏，从而导致果实腐烂。本研究明确了一种方便可行的香蕉PLA活性测定方法，为深入研究香蕉PLA的催化作用机制奠定基础。

关键词： 香蕉 磷脂酶A 酸碱滴定法 酶活性 炭疽病