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酸碱滴定法优化香蕉磷脂酶A活性测定及炭疽病胁迫下其活性变化研究

文献类型: 中文期刊

作者: 陈瑜娴 1 ; 李丽 2 ; 李静 1 ; 孙健 3 ; 易萍 2 ; 黄方 2 ; 黄敏 2 ; 甘婷 2 ;

作者机构: 1.桂林理工大学化学与生物工程学院

2.广西壮族自治区农业科学院农产品加工研究所

3.广西果蔬贮藏与加工新技术重点实验室

关键词: 香蕉;磷脂酶A;酸碱滴定法;酶活性;炭疽病

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2024 年 008 期

页码: 1651-1658

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 植物磷脂酶A(phospholipase A,PLA)是细胞膜磷脂代谢中的关键酶,可以催化磷脂分子上多个功能基团发生裂解生成信号分子,参与调节植物生长发育以及环境和生物胁迫,具有重要研究价值。本研究主要考察底物浓度、反应温度、缓冲溶液pH、缓冲溶液体积、反应时间等多种因素对香蕉PLA催化卵磷脂水解活性的影响,从而优化磷脂酶A活性测定方法,进一步根据最佳测定条件研究炭疽病胁迫下香蕉PLA活性的变化趋势。结果表明,酸碱滴定法测定香蕉PLA活性的优化条件:反应体系pH 9,底物浓度为4 g/L,反应温度为55℃,底物为15 mL,酶粗提液为3 mL,提取缓冲液体积与果皮重量的比值(mL/g)为3,反应时间为7 h。在最优条件下对炭疽病胁迫下的香蕉果皮组织进行PLA活性测定,发现果皮的病害程度与PLA活力呈正相关,即随着病害程度加深,PLA活性增大,且远大于对照组。表明PLA活性大小可能与果实的抗性有关,随着果实病害程度加深,PLA活性增大,膜磷脂降解,细胞膜的完整性被破坏,从而导致果实腐烂。本研究明确了一种方便可行的香蕉PLA活性测定方法,为深入研究香蕉PLA的催化作用机制奠定基础。

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