科研产出
机械伤胁迫对香蕉采后膜脂代谢的影响
《食品与发酵工业 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：该研究从细胞膜降解角度研究机械损伤对香蕉果实的影响。为保持香蕉采后品质提供理论依据，该研究以“桂蕉6号”香蕉为试验材料，对香蕉样品进行机械伤处理，并在25℃、相对湿度90%～95%条件下贮藏15 d,测定贮藏过程中香蕉果皮细胞膜渗透率、细胞膜降解关键酶活性、细胞膜磷脂含量及磷脂酶D(phospholipase D,PLD)基因表达量等相关指标的变化。结果表明，机械伤处理导致采后香蕉贮藏期间果皮细胞膜渗透率上升，香蕉果皮的磷脂酶C(phospholipase C,PLC)、PLD、脂氧合酶(lipoxygenase, LOX)、甘油二酯激酶(diacylglycerol kinase, DGK)、脂磷酸磷酸酶(lipid phosphate phosphatase, LPP)的酶活性上升，且显著高于对照组(P<0.05);机械伤胁迫使果皮膜磷脂含量发生变化，磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine, PE)含量下降，磷脂酸(phosphatidic acid, PA)、磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine, PC)、甘油二酯(diacylglycerol, DAG)含量累积；机械伤诱导果皮MaPLD1及MaPLD4基因表达量增加，且显著高于对照组(P<0.05),同时抑制了MaPLD3基因的表达。综合分析可知，机械损伤胁迫通过加速膜脂代谢，导致香蕉果皮细胞膜结构和功能破坏，是香蕉果实采后品质下降的主要原因之一。该研究旨在探讨机械损伤对香蕉果实采后品质的影响及其机理，为提高香蕉果实采后储存品质提供理论依据。
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一株白僵菌对红火蚁的毒力及对免疫酶活性与基因表达的影响
《环境昆虫学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：白僵菌是最具防治害虫潜力的一类昆虫病原真菌.本研究测定了球孢白僵菌Beauveria bassiana 237菌株对红火蚁Solenopsis invicta的感染毒力,并探究了白僵菌侵染对红火蚁免疫相关酶活性及相关基因表达的影响.结果显示,该白僵菌菌株对红火蚁的毒力较强,在孢子悬浮液108孢子/mL浓度下,对红火蚁的致死中时间LT50为5.288±0.2014 d;在104~108孢子/mL的不同浓度处理下,红火蚁死亡率随孢子浓度的增加而显著增加.经计算,第4~10天致死中浓度LC50值由8.82×106孢子/mL降低到8.95×105孢子/mL.红火蚁被球孢白僵菌感染后,体内保护酶和解毒酶发生了不同程度的改变.其中保护酶类酚氧化酶(PO)的活性在白僵菌处理后的第12 h已出现抑制,而在第24 h、48 h、72 h时均显著高于对照;超氧化物歧化酶(SOD)活性在12 h时与对照无显著差异,但在24~48 h阶段酶活显著上升,之后下降;过氧化物酶(POD)在较早时段保持与对照无显著差异水平,至中后期48~72 h出现持续升高.解毒酶类混合功能氧化酶系(MFO)的活性在整个检测时间段内表现为抑制-上升-抑制-上升的波动状态;谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的变化与SOD相似,只在24~48 h阶段出现上升.白僵菌还导致红火蚁免疫信号通路Toll途径相关基因表达量变化.在处理后12 h,识别因子GNBP1、Spaetzle即被激活,维持上调-回调波动趋势;而信号传递因子Myd88、pelle在检测的12~72 h内基本处于被抑制状态,只有Myd88在48 h时表达量上升;转录因子Dorsal以及抗菌肽Defensin在12~24 h都已被显著激活,而在后续48~72 h被抑制.综上所述,球孢白僵菌237菌株通过调节红火蚁酶活以及免疫相关基因的表达量实现成功侵染和致病作用,具有很高的生防应用价值.
关键词： 球孢白僵菌 红火蚁 毒力 酶活 Toll通路 免疫
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产纤维素酶大肠杆菌工程菌的构建和酶的表达
《基因组学与应用生物学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了使大肠杆菌(Escherichia coli)具备生产纤维素酶的能力,从铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PKC-001克隆碱性纤维素酶基因,进行密码子优化后连到载体pET-22b,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,对工程菌进行表达优化并分析纤维素酶酶活.结果表明大肠杆菌工程菌能生产分子量约39 kD的纤维素酶,在培养温度20℃、摇床转速170 r/min、IPTG终浓度0.01 mmol/L的条件下,纤维素酶的产量最大;在酸性条件下,细胞内和细胞外的滤纸酶活力(FPA)分别为5.78 U/mL和1.13 U/mL,在碱性条件下检测不到滤纸酶活.显然,重组纤维素酶仅在酸性条件下有活力.
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酿酒酵母Mbp1基因缺失突变株耐受性研究
《基因组学与应用生物学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为了研究Mbp1基因对工业酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)耐受性的影响,在敲除野生型工业酿酒酵母MF1015菌株Mbp1基因的基础上,分析Mbp1基因缺失菌株(突变菌株)与野生型在乙醇耐受性、耐热性、细胞壁完整性、呼吸强度、海藻糖含量、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、乙醇脱氢酶(ADH)活性等方面的差异。结果表明:在含刚果红或SDS的平板上突变菌株的菌落比野生型小、菌体存活率比野生型低;突变菌株的乙醇耐受性和耐热性均下降,在乙醇浓度为9%的液体培养基中,突变菌株的最大OD600约为3.15,而野生型最大OD600值约为3.48;在30℃和37℃时突变菌株和野生型的生长趋势基本一致,而在40℃时,突变菌株最大OD600约为3.0,而野生型约为4.5;用9%乙醇处理后,突变菌株胞内海藻糖含量、过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、乙醇脱氢酶酶活分别比野生型低49%、80%、24%、37%、73%,而未经乙醇处理的突变菌株和野生型酶活无明显差别。推测Mbp1基因有助于工业酿酒酵母适应外部不良环境。
关键词： Mbp1基因 耐受性 酿酒酵母 海藻糖 酶活 乙醇
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