科研产出
发根农杆菌介导的金花茶毛状根活体遗传转化体系的建立
《基因组学与应用生物学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：金花茶（Camellia petelotii）是我国特有的植物资源，具有较高的观赏价值和药用价值，建立转基因体系可为开展金花茶特定基因功能鉴定和金花茶性状遗传改良提供基本方法。本研究以金花茶成熟叶片为材料，分别以携带红色荧光蛋白基因DsRed2和发育调节因子GRF5的发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）进行离体转化，利用石蜡切片观察叶柄切口处愈伤组织和毛状根的细胞形态。结果表明，金花茶叶柄切口处在发根农杆菌侵染后22 d时就有愈伤组织出现，72 d时生根率达到10.00%左右，而ddH2O对照处理的金花茶叶柄切口处愈伤组织形成的时间较晚，且无毛状根产生。同时，发根农杆菌K599可将外源基因DsRed2和发育调节因子GRF5转入毛状根基因组中，转基因效率为0.83%～3.33%。石蜡切片显示GRF5转基因金花茶愈伤组织中活性细胞较DsRed2转基因愈伤组织中的多，GRF5转基因毛状根中可观察到从内皮层产生毛状根原基，内皮层及中柱鞘细胞染色程度深，细胞活性强。本研究用携带荧光蛋白和发育调节因子基因的发根农杆菌侵染金花茶离体成熟叶片的叶柄切口，诱导金花茶产生转基因毛状根，初步建立了金花茶转基因毛状根诱导体系，为后续金花茶花色和药用次生代谢物含量等性状的遗传改良提供了新思路。
关键词： 金花茶 发根农杆菌 转基因毛状根 石蜡切片 离体叶片转化
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广西金花茶根系丛枝菌根真菌染色方法探讨
《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：金花茶(Camellia nitidissima)为山茶科山茶属植物,属于国家一级保护植物,具有很高的观赏价值及药用价值.但目前金花茶野生资源少,因此寻找高效的人工种植方法快速繁殖金花茶优良种苗,进而大幅度提高规模化种植金花茶的产量十分必要.丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)真菌能显著促进植物生长发育、提高作物产量、增强植物抗逆性和抗病性,金花茶接种AM真菌,对金花茶有积极的影响.由于几乎所有的AM真菌接种试验均涉及菌根发育状况观察与侵染率测定,而目前 AM 侵染状况的观察测定方法种类繁多,良莠不齐,因此本研究探究一种金花茶根系AM真菌检测的最佳染色方法,以便更好地观察AM真菌对金花茶根系的侵染情况.本研究以金花茶健康植株根系为试验材料,探讨 5 种染色剂(苏丹红Ⅳ、酸性品红、苯胺蓝、台酚蓝、醋酸墨水)对金花茶根系AM真菌的染色效果.研究表明:5%醋酸墨水染色液的染色效果最佳,根皮层细胞内AM真菌的菌丝、泡囊、孢子等结构清晰可见,且能够明确分辨AM真菌与其他未知真菌,根的染色效果可以长久保存;利用苏丹红Ⅳ和酸性品红染色的AM真菌菌丝、泡囊与背景反差不明显,而且酸性品红的染色效果保存时间短,不利于观察;苯胺蓝和台酚蓝的染色效果略次于醋酸墨水,且价格昂贵,成本高.除醋酸墨水外,其他 4 种染色剂均是疑似致癌物,长期使用对操作人员的健康产生非常大的安全隐患.醋酸墨水染色操作简便、毒性低、成本低廉、染色效果极佳,适用于金花茶根系 AM 真菌的染色和制片观察.本研究结果可为今后金花茶菌根种苗的应用提供新的思路.
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金花茶1年多次抽梢栽培技术研究
《广西林业科学 》 2023
摘要：为获取高品质金花茶(Camellia petelotii)叶,以自研有机菌肥、普通有机肥和化肥为研究对象,探究不同施肥处理对金花茶抽梢率及植株和叶片生长的影响.结果表明,3-4月,自研有机菌肥与普通有机肥+追施化肥处理均可有效促进金花茶抽梢,使金花茶1年抽梢2次;2种处理的金花茶树高和冠幅均极显著高于其他处理.自研有机菌肥处理的金花茶叶长、叶宽、叶面积、叶片厚度和鲜叶重均显著高于其他处理,说明自研有机菌肥可提高金花茶叶产量和质量.
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3种金花茶花芽分化进程及形态学特征比较
《西南农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析金花茶（Camellia petelotii）、四季金花茶（C.perpetua）和淡黄金花茶（C.flavida）花芽分化进程及形态特征,明确其开花特性,为金花茶类植物的长花期育种提供参考依据。【方法】对3种金花茶花芽分化过程进行动态拍摄,解剖观察其各阶段花芽的外部形态,并通过改良石蜡切片技术观察花芽分化不同时期的结构特征。【结果】金花茶花芽分化持续66 d,四季金花茶花芽分化持续30 d,淡黄金花茶花芽分化持续43 d。四季金花茶和金花茶花芽分化不同步,其中,金花茶在5-8月均有花芽陆续分化,四季金花茶全年均有花芽分化。在3种金花茶花芽分化过程中,花芽的横径与花芽分化所处阶段密切相关,可根据花芽横径大小判断花芽所处分化阶段。依据花芽解剖结构的差异和形态特征,可将3种金花茶花芽分化过程分为未分化期、分化初期、苞片分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期、雌蕊分化期和子房形成期7个时期。【结论】金花茶、四季金花茶和淡黄金花茶的花芽分化过程相似,但四季金花茶花芽分化速度最快,存在明显的重叠分化现象,可为金花茶类植物育种、园林应用和研究其开花调控机制提供形态学依据。
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不同种金花茶对炭疽病的自然抗性评价
《中国植保导刊 》 2019 北大核心
摘要：2018年对广西农业科学院花卉研究所种质资源圃收集的15种金花茶叶片炭疽病发病情况进行了系统调查,根据发病率采用聚类分析对金花茶炭疽病自然条件下的抗性进行评价.结果 表明,不同种金花茶对炭疽病抗性差异较大,其发病率在4.07%~81.48%之间.根据发病率进行聚类分析,15个种的抗性水平分为5个类群:第1类群抗性最高,发病率为4.07% ~5.93%,包括毛籽金花茶(Camellia ptilosperm)、弄岗金花茶(C.grandis)和顶生金花茶(C.pingguoensis);第5类群抗性最差,发病率为75.56%~81.48%,包括罗斯曼金花茶(C.rosmannii)和大叶凹脉金花茶(C.impressinervis).根据植株形态学特征以及炭疽病的抗性水平分化分析,凹脉金花茶和显脉金花茶可能分别存在种级水平分类地位以下的分化.
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不同粒径金花茶茶花粉体物理特性
《食品科学 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：研究3种不同粒径范围金花茶茶花粉体的流动性、溶解性、功能成分皂苷溶出量等物理特性,并结合激光粒度分布仪和扫描电子显微镜进行直观分析。结果表明:普通粉(平均直径133.90μm)、超微粉(平均直径15.76μm)、纳米粉(平均直径201.50 nm)的粒径依次减小,细胞破碎程度、不规则度依次增加,差异显著;随粒径减小,粉体的流动性、松密度、润湿性、膨胀力先减小后增加,以普通粉最高;持水力普通粉最高,超微粉次之;水溶性、皂苷溶出量呈现先增大后略微减小的趋势。说明不同粒径金花茶茶花粉体特性各不相同,综合比较下,超微粉具有较高的溶解率、皂苷溶出量,更容易被人体吸收,生物利用度高,加工方便,具有较好的开发前景。
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金花茶种子萌发与快速繁殖技术研究
《南方农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究防城港金花茶种子萌发及组培快繁技术,初步建立金花茶组织培养体系,为金花茶的组培快繁利用提供参考。【方法】以金花茶种子为外植体进行组织培养试验,设置3个不同种子的发育程度处理、17个不同培养基的激素浓度处理,测定不同处理对金花茶种子萌发率、增殖系数、株高、叶片数等的影响,筛选出适宜金花茶组培苗生长的萌发、继代和壮苗培养基。【结果】选用胚乳直径大于1.0 cm的金花茶种子接种于MS+GA31.0 mg/L培养基中,萌发率可达82.4%;金花茶组培苗增殖系数随6-BA浓度增加呈先上升后下降的变化趋势,当6-BA浓度为3.0 mg/L时增殖系数最大,达3.79;适宜金花茶壮苗生长的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,其平均株高、叶片数、茎粗等均优于其他处理;在黄泥∶泥炭=1∶1组合处理下金花茶组培苗移栽生根率最高,达61%,成活率也较高,为90%。【结论】广西防城港金花茶适宜的种子萌发培养基为MS+GA31.0 mg/L、继代增殖培养以MS+6-BA 3.0 mg/L效果较好、壮苗培养基以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L较适宜、黄泥∶泥炭=1∶1作为金花茶组培苗移栽基质最适宜。
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广西金花茶炭疽病的病原鉴定及其寄主抗性评价(英文)
《广西农业科学 》 2009
摘要：于2003年首次在广西防城金花茶国家级自然保护区发现金花茶炭疽病,并从病叶上分离出金花茶炭疽菌;根据致病性测定和病原菌株形态观察结果,将其鉴定为Colletotrichum camelliae Mass.,由该菌引起的金花茶炭疽病在广西属首次报道。为了寻找炭疽病的抗源,通过测定13种金花茶和3种山茶对金花茶炭疽病菌的抗性,结果表明:防城金花茶(C.chrysantha var.phaeopubisperma S.Y.Liang et Z.H.Tang)、东兴金花茶(C.tunghinensis Chang)、多瓣金花茶(C.multipetala S.Y.Liang et C.Z.Deng)、小花金花茶(C.micrantha S.Y.Liang et C.Y.Zhong)、顶生平果金花茶(C.pingguoensis var.terninalis(Liang et su)S.Y.Liang)5个种或变种表现抗病反应;博白大果油茶(Camellia gigantocarpa Hu et T.C.Huang)、红山茶(Camellia japonica Linn)的红露珍品种、金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)以及显脉金花茶(Camellia euphlebia Merr.ex Sealy)对Colletotrichum camelliae表现为免疫反应,这些抗性材料将为金花茶的种质改良提供优质抗源。
关键词： 金花茶 病原鉴定 Colletotrichum camelliae Mass. 寄主 抗性评价
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