科研产出
基于23S/5S rDNA序列的柑橘黄龙病病原菌亚洲种系统发育研究
《生物技术通报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：根据柑橘黄龙病亚洲种23S/5S的DNA序列设计一对引物对不同地理来源的6个柑橘黄龙病样品DNA进行扩增,扩增片段大小均为1 654 bp包括一个假定细胞壁水解酶假基因(putative cell wall hydrolase pseudogene)和5S rRNA基因。序列同源性分析结果表明;6个柑橘黄龙病病原菌样品与柑橘黄龙病病原菌亚洲种Sihui样品的同源性为99%,然而与土壤杆菌,布鲁氏菌,根瘤菌,中华根瘤菌,巴通体菌和中慢生根瘤菌的同源性只有89%～95%,说明在23S/5S rDNA序列上黄龙病病原菌亚洲种与α变形菌纲根瘤菌目的其他病原菌相差较大。对黄龙病病原菌亚洲种种内的23S/5S rDNA序列进行比较分析,结果发现黄龙病病原菌亚洲种种内之间putative cell wall hydrolase pseudogene和5S rRNA的基因序列非常保守,但不同地理来源的柑橘黄龙病样品碱基序列间确实存在差异,差异的大小与地理的远近无关。利用简约法对黄龙病病原菌亚洲种及α变形菌纲其它病原菌的23S/5S rDNA序列构建的系统发育树显示黄龙病病原菌亚洲种单独聚为一类,其他细菌聚为另一类,该结果与基于rplJ基因及16S rRNA基因的DNA序列构建的分子系统进化树结果一致。
关键词： 柑橘 黄龙病 亚洲种 23S/5S rDNA
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利用基因组步行方法克隆柑橘黄龙病病原菌亚洲种序列
《园艺学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：对NCBI基因库黄龙病亚洲种病原菌序列进行拼接,并根据拼接结果在rplKAJL-rpoBC,16S/23S rRNA和omp3个位点上设计引物,采用基因组步行方法,在其亚洲种3个位点上共获得了15168bp非冗余新序列,其中,在rplKAJL-rpoBC位点上5′端上游区和3′端下游区分别获得了3218和2653bp的非冗余新序列;在16S/23S rRNA位点上5′端上游区和3′端下游区分别延伸了1853和2459bp的新序列;在omp基因位点上分别获得了4014和971bp的新序列。序列分析表明在rplKAJL-rpoBC位点上的新序列包含2个新基因(suhB和serA);16S/23S rRNA位点新序列包含4个新基因(膜转运蛋白基因、细胞壁脱氢酶假基因、5S rRNA、tRNAMet),omp位点新序列包含6个新基因(rpsB、tsf、pyrH、frr、cdsA2、cds2)。这些新序列的获得为以PCR为基础的黄龙病相关研究提供了有用的参考依据。
关键词： 柑橘 黄龙病 Candidatus Liberibactor 序列
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