科研产出
蚕沙纤维素降解菌HB-2菌株的分离、鉴定及酶活性分析
《南方农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】筛选蚕沙纤维素降解菌株,为蚕沙无害化快速腐熟处理提供优质菌种。【方法】以蚕沙为材料,利用CMC-Na培养基分离蚕沙纤维素降解菌,通过形态学、生化特征和16S rDNA序列测定方法等对分离获得的纤维素降解菌进行分类学鉴定,并研究碳源、氮源、pH、培养时间和培养温度对分离菌株产酶活力的影响。【结果】从蚕沙中筛选出1株高温型细菌,命名为HB-2菌株。根据菌体大小、鞭毛着生位置及数量、16S rDNA核酸序列分析,并结合生理生化特性,HB-2菌株鉴定为短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)。HB-2菌株最佳产酶条件为复合碳源(蚕沙+微晶纤维素+米糠+麸皮)、复合氮源(蛋白胨+酵母膏),产纤维素酶最适反应pH 6.5,最适温度35℃。【结论】HB-2菌株CMCase活性较敏感且产酶量大,具有制成菌剂应用于蚕沙无害化快速腐熟的潜力。
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A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备鉴定
《黑龙江畜牧兽医(上半月) 》 2016 北大核心
摘要：为了深入了解VP1蛋白的结构和功能,并建立A型口蹄疫(FMD)血清抗体检测方法,试验采用纯化的重组蛋白pET-32a-VP1免疫Balb/c小鼠,以纯化的重组蛋白pGEX-6p-1-VP1作为检测抗原包被酶标板检测抗体效价.将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,其杂交瘤细胞用间接ELISA法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为1D10、3D12、4E12和5G7.结果表明:这4株单克隆抗体均为IgM亚型和K轻链,单克隆抗体间可能识别同一个表位,或表位重叠性大.4株单克隆抗体均能被A型FMDV阳性血清所阻断,具有特异性,且以单克隆抗体4E12产生的抗体效价最高、稳定性强、亲和力最大,并能与重组蛋白FMDV-A-VP1特异性结合.说明单克隆抗体4E12可作为单克隆抗体竞争ELISA法的竞争抗体用于检测A型FMDV血清抗体.
关键词： A型口蹄疫病毒 VP1蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定 竞争ELISA法
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A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
《黑龙江畜牧兽医 》 2016 北大核心
摘要：为了深入了解VP1蛋白的结构和功能,并建立A型口蹄疫(FMD)血清抗体检测方法,试验采用纯化的重组蛋白p ET-32a-VP1免疫Balb/c小鼠,以纯化的重组蛋白p GEX-6p-1-VP1作为检测抗原包被酶标板检测抗体效价。将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,其杂交瘤细胞用间接ELISA法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为1D10、3D12、4E12和5G7。结果表明:这4株单克隆抗体均为Ig M亚型和κ轻链,单克隆抗体间可能识别同一个表位,或表位重叠性大。4株单克隆抗体均能被A型FMDV阳性血清所阻断,具有特异性,且以单克隆抗体4E12产生的抗体效价最高、稳定性强、亲和力最大,并能与重组蛋白FMDV-A-VP1特异性结合。说明单克隆抗体4E12可作为单克隆抗体竞争ELISA法的竞争抗体用于检测A型FMDV血清抗体。
关键词： A型口蹄疫病毒 VP1蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定 竞争ELISA法
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早熟沙田柚生物学特性观察与病毒病鉴定
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以来源于沙田柚的一个优良变异"早熟沙田柚"为材料,观察其生物学特性,并进行病毒病鉴定,为制定"早熟沙田柚"栽培技术、病害防控及推广应用提供理论依据。结果表明,"早熟沙田柚"树势强,树形开张,幼树生长量大,易形成树冠,树冠圆头形,在广西桂林一年抽梢4次,植后3~4年开始结果,人工异花授粉坐果率1.52%~7.38%,果实成熟期在9月中下旬至10月初,果实重量828.19~1418.38 g,平均单果重1014.73 g,进入盛果期后,产量可达37.5~60.0 t/hm2,表现早熟、优质、高产;茎尖嫁接成活10株,经鉴定,其中8个单株不带柑橘黄龙病、碎叶病、衰退病及裂皮病。适宜在广西、广东及湖南等沙田柚产区的水田、旱地种植,但较易感柑橘溃疡病,应注意预防。
关键词： 早熟沙田柚 植物学特征 生物学特性 抗性 病毒病 鉴定
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三七主要病害生防真菌F2的抑菌作用测定及其鉴定
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：从三七根际土壤里初步分离筛选到一株对三七多个病原菌具有抑菌作用的真菌F2,研究测试其对三七黑斑病菌(Alternaria panax)、炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)和根腐病菌(Fusarium solani)的抑菌率及其对各病原菌菌丝形态的影响。结果表明,真菌F2对三七黑斑病菌、炭疽病菌和根腐病菌的抑菌率较高,分别为88.67%、91.00%和75.76%。显微观察发现,真菌F2可造成三七黑斑病菌和炭疽病菌菌丝膨大、畸形、断裂,造成三七根腐病菌菌丝断裂。结合形态学和分子生物学特征将生防真菌F2鉴定为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。
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广西淮山根腐线虫病病原鉴定
《南方农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确广西淮山根腐线虫病病原种类,为生产上淮山根腐线虫病的防治提供理论依据。【方法】从广西淮山主产区采集有病斑的淮山块茎,连同根际土壤一起带回实验室;通过直接浸泡分离法和改良贝曼漏斗法分离线虫,应用形态学和分子生物学方法对分离获得的线虫进行种类鉴定。【结果】从淮山病薯和病土中分离到一种线虫,其块茎虫口密度最高达704头/cm~2。线虫虫体蠕虫形,较为短粗,唇区低平,口针粗而短基部球宽,圆形;食道腺覆盖肠腹面,中食道球十分显著,卵圆形雌虫阴门横裂,位于虫体后端,确定为短体线虫属。分离的线虫与咖啡短体线虫的28S rDNA序列同源性最高,与两个已知的咖啡短体线虫在系统发育树上形成一个分支,验证可信度均达97%。【结论】经形态学结合分子生物学分析鉴定,确定危害广西淮山的根腐线虫为咖啡短体线虫(Pratylenchus coffeae)。
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广西百色烟草青枯病的危害调查与病原菌分离鉴定
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：2014-2015年对广西百色烟区的烟草青枯病发生危害情况进行了较为全面的调查,并对具有典型青枯病症状的烟株进行病原菌分离及致病性鉴定。结果显示,烟草青枯病在百色市的靖西县、德保县、乐业县和凌云县主要种烟区普遍发生,部分茎下部黑色坏死病株复合感染黑胫病和根黑腐病中的一种或两种病害;隆林县的病害样本没有分离和检测出青枯病菌,推测该县烟草根茎类病害主要为根黑腐病和黑胫病。从百色市各主要烟区采集到疑似烟草青枯病害样本170个,通过特异培养基分离和青枯菌演化型鉴定获得青枯病菌137株,柯赫法则验证共有92株菌株为烟草青枯病致病菌株。选取其中典型菌株D3-12进行病原菌分类学鉴定,通过菌株16S r DNA序列测定和同源性分析,结合菌株的形态学观察、生理生化指标测定,将D3-12菌株鉴定为青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)。
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利用SSR分子标记技术鉴定和分析茄子杂种F_1的纯度
《南方农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析、鉴定茄子杂种F1纯度,为提高茄子杂交育种效率提供参考依据。【方法】在育苗期,采用SSR分子标记技术对栽培茄×栽培茄正、反杂交种和野生茄×栽培茄杂交种进行纯度鉴定及亲缘关系分析。【结果】从124对SSR引物中筛选出15对在亲本间存在差异、扩增稳定、条带清晰的引物;从210株杂种F1单株中共鉴定出208株真杂种,杂种纯度为99.0%,鉴定结果与田间性状调查结果一致;栽培茄×栽培茄正、反交组合的F1与亲本的亲缘关系均较近,遗传关系差别微小;野生茄×栽培茄组合的F1与父本的亲缘关系均较远,且表现出偏母本遗传。【结论】SSR分子标记技术能快速、准确鉴定茄子杂交后代的纯度,可作为分子标记辅助育种手段用于指导选择符合茄子育种目标的优良杂交品种选育。
关键词： 茄子 SSR分子标记技术 杂种纯度 鉴定 亲缘关系分析
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旱稻孢囊线虫在广西的发生及其rDNA-ITS异质性分析
《中国水稻科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：2011年,从广西龙胜梯田的水稻根系和稻田土壤中分离到一种孢囊线虫。该线虫形态特征与已报道的旱稻孢囊线虫(Heterodera elachista)相符,其rDNA-ITS序列与GenBank中旱稻孢囊线虫的rDNA-ITS序列相似性为97.7%~99.3%。rDNA-ITS分子发育树表明该线虫与旱稻孢囊线虫以100%的置信度及较小的遗传距离形成一个单系,据此将该线虫鉴定为旱稻孢囊线虫。进一步对本研究获得的10条旱稻孢囊线虫rDNA-ITS区序列及Tanha Maafi等报道的1条旱稻孢囊线虫rDNA-ITS序列(AF498391)的酶切位点进行分析,结果发现AluⅠ、AvaⅠ、MvaⅠ和RsaⅠ4个内切酶的酶切位点在11条序列中完全一致,而Bsh1236Ⅰ、BsuRⅠ和CfoⅠ3种酶的酶切位点存在变异,其中Bsh1236Ⅰ和BsuRⅠ有2种变异型,CfoⅠ则有3种变异型,表明旱稻孢囊线虫的rDNA-ITS序列存在DNA异质性。
关键词： 旱稻孢囊线虫 水稻 鉴定 rDNA-ITS 异质性
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