科研产出
芒果MiRab11基因及突变体的原核表达分析
《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为研究芒果MiRab11蛋白的互作及其它生物学功能,本文在MiRab11基因序列基础上,采用重叠PCR定点突变技术,获得了2个结构域突变体Mi-Rab11CA和Mi-Rab11DN,将其构建原核表达载体,并成功转化大肠杆菌BL21。SDS-PAGE结果显示,在28℃条件下,用0.5 mmol/L IPTG诱导4 h,可获得大量可溶性蛋白的表达。将可溶性蛋白经Ni-NTA argrose层析柱纯化并western blot鉴定,该重组蛋白均可与抗His单克隆抗体发生特异性免疫反应。本研究为深入研究芒果pET-Rab11蛋白生理活性、特异性结合位点及功能调控打下良好基础。
关键词： 芒果 MiRab11 突变体蛋白 原核表达 纯化 鉴定
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野生稻抗稻瘟病渗入系的培育及抗性分子分析
《西南农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：稻瘟病是严重威胁水稻种植生产的三大主要病害之一。采用抗稻瘟病的野生稻种质材料为供体亲本,与栽培稻测253和GX-12为轮回亲本,通过多代杂交、回交和自交,培育出6个野生稻渗入系群体。经过自然诱发鉴定和苗期人工鉴定,分别从野生稻渗入系群体C1、C2和G1筛选出69份抗稻瘟病材料。其中,抗稻瘟病生理小种ZA1的渗入系材料有38份,抗ZB17小种21份,抗ZC13小种10份。随后,以对ZA1小种表现抗性的C1选择群体为定位群体,运用基于"遗传搭车"原理的卡方分析法挖掘稻瘟病抗性基因/QTL位点,分别在1、2、5、6号染色体上检测到11个抗病QTLs。研究结果可为今后水稻抗病新品种选育提供重要的基因材料和技术理论依据。
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发酵床中纤维素降解菌的分离与鉴定
《生物技术通报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：从发酵床垫料中初步分离出43株纤维素降解菌。采用刚果红鉴别培养基及滤纸条培养基初筛,得到5株透明圈较大且使滤纸条产生崩解的菌株,通过进一步液体发酵,测定其CMC酶活、FPA酶活和天然纤维素酶活,获得2株具有较高纤维素降解活性菌株,并分别命名为F7和F21。经16S rRNA基因序列分子生物学鉴定和系统发育分析表明,这2株纤维素降解菌分别归属为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和链霉菌(Streptomyces sp.)。
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广西甘蔗病毒病害调查及病原病毒鉴定
《南方农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】了解广西甘蔗病毒病种类和发生情况,明确其病原病毒种类及分布,为针对性地开展甘蔗病毒病防治提供理论依据。【方法】2012~2013年对广西14个地市主要甘蔗种植区的甘蔗病毒病害发生情况进行调查采样,用RT-PCR等方法对田间采集的疑似病毒病样品进行病原鉴定。【结果】广西蔗区发生的病毒病主要为甘蔗花叶病,在全区范围内普遍发生;甘蔗黄叶病在大部分蔗区发生,但程度不及甘蔗花叶病。采集的192个样品中有116个样品检测出病毒,分别是高粱花叶病毒(Sr MV,占47.9%)、甘蔗花叶病毒(SCMV,占15.6%)和甘蔗黄叶病毒(SCYLV,占6.8%),其中Sr MV和SCMV复合感染占5.7%,Sr MV和SCYLV复合感染占1.6%,SCMV和SCYLV复合感染占2.1%,Sr MV、SCMV和SCYLV 3种病毒复合感染占1.6%。【结论】目前广西甘蔗种植区发生的甘蔗病毒病主要由Sr MV和SCMV引起,且病毒复合感染较严重,需在甘蔗健康种苗的培育和生产中加强病毒检测。
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广西水稻线虫的分离鉴定
《南方农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确广西部分稻区水稻长势差、叶尖端扭曲成灰白色干尖的原因,为生产上该病害的治理提供理论依据。【方法】通过直接浸泡分离法和改良贝曼漏斗法分离线虫,应用形态学和分子生物学手段相结合的方法对线虫进行鉴定。【结果】从水稻稻穗和稻秆中分离到一种线虫,形态鉴定显示,热杀死后雌虫唇区扩张,缢缩明显,口针较细,口针基部球稍膨大,中食道球长圆形,约占体宽的3/4,峡部细,食道腺背面覆盖肠,雌虫阴门位于虫体中后部,卵巢1个;用特异引物对其进行基因序列扩增,得到一条约300 bp的片段,确定造成广西部分水稻叶尖端干尖症状的病原为水稻干尖线虫。【结论】水稻干尖线虫在广西有分布和危害,应采取措施避免其扩散蔓延。
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罗非鱼无乳链球菌的分离鉴定
《贵州畜牧兽医 》 2014
摘要：从南宁市某淡水罗非鱼养殖场的濒死罗非鱼分离获得7株优势菌株,经人工腹腔注射感染罗非鱼,仅发现菌株LFY-5注射后的罗非鱼出现与自然发病罗非鱼相似的症状,死亡率高达60%。经检测,LFY-5菌株为链状或成对排列的革兰氏阳性球菌,单个球形菌体直径为1.0~1.2μm,在血琼脂培养基上呈β-溶血;对阳性克隆进行DNA检测得到长度为1 510 bp的16 S rRNA基因片段,即分离菌株为无乳链球菌(S.agalactiae)。药敏试验结果显示,菌株LFY-5对头孢氨苄、万古霉素、头孢唑啉、头孢哌酮、新生霉素等18种药物高度敏感,但对菌必治、复达欣、替卡西林、头孢噻肟等8种药物不敏感。
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产普鲁兰酶克雷伯氏菌的分离鉴定及酶学性质研究
《广西科学 》 2013
摘要：利用曲里苯蓝法从淀粉加工厂废水氧化池酸性污泥样品中筛选普鲁兰酶产生菌,对筛选到的GXAS-38菌株进行形态观察、生理生化特征分析、16SrDNA序列系统发育分析和普鲁兰酶酶学性质研究,并用PCR方法克隆GXAS-38菌株的普鲁兰酶基因。结果表明,GXAS-38菌株属于肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae),其产普鲁兰酶的最适反应温度为60℃,在温度35～50℃时酶活较稳定;最适反应pH值5.5,在pH值5.0～7.5时酶活较稳定。Ca2+、Na+和Li+对GXAS-38菌株的普鲁兰酶活性有激活作用;Cu2+、Zn2+、Co2+、Mn2+、Fe2+、Fe3+和Ba2+对GXAS-38菌株的普鲁兰酶活性有抑制作用;螯合剂EDTA能够强烈地抑制GXAS-38菌株的普鲁兰酶活性,GXAS-38菌株的普鲁兰酶反应需要金属离子参与。GXAS-38菌株完整的普鲁兰酶编码基因全长3291bp,编码1096个氨基酸。
关键词： 普鲁兰酶 肺炎克雷伯氏菌 分离 鉴定 酶学性质 基因克隆
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水葫芦生防菌的分离筛选及初步鉴定
《南方农业学报 》 2013 CSCD
摘要：【目的】分离筛选对水葫芦具有强致病性菌株,为水葫芦生物防治奠定理论基础。【方法】利用组织分离法,从自然发病水葫芦叶片上分离获得对水葫芦有强致病性的菌株并纯化培养;用玻片保湿法观察菌株分生孢子与分生孢子梗形态特征;根据柯赫氏法则对自然发病与接种叶片发病情况进行验证对比;通过查阅《真菌鉴定手册》对菌株进行形态学鉴定。【结果】经组织分离法提取纯化得到菌株BG11,该菌在PDA上生长较好,菌落紧密,表面灰白色,呈绒毛状;分生孢子合轴产生,2~5个分生孢子着生在分生孢子梗上,分生孢子为短圆柱形,单胞无色,有油球,长度为12.50~17.50μm,大多数为13.75~17.00μm,宽度为4.50~5.50μm;将BG11菌株接种到健康水葫芦叶片上表现为自然发病叶片类似症状,且两者分生孢子梗及分生孢子形态一致。【结论】初步鉴定BG11菌株为水葫芦炭疽菌Colletotrichum sp.,对水葫芦具有强致病性。
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