科研产出
白茶中金花菌的分离与鉴定
《农业研究与应用 》 2021
摘要：金花白茶是白茶中的一种新兴产品。研究金花白茶中金花菌的类型有利于为白茶产业的创新发展提供一定的参考依据。本研究以产自2018年的湖南湘丰牌桑植白茶作为材料,通过平板涂布法及三点接种法分离纯化金花菌,采用形态学观察并联合分子生物学手段对所获得的分离株进行鉴定。分离获得一株金花菌BC-1,经菌落特征、显微形态观察、ITS测序及系统进化树构建,将该菌鉴定为冠突曲霉（Aspergillus cristatum）。从白茶中分离获得的金花菌BC-1为冠突曲霉（A.cristatum）,丰富了白茶中金花菌的分类鉴定研究,对金花白茶的开发利用提供一定的参考。
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高速逆流色谱法分离黄柏中4种生物碱的方法研究
《湖南农业科学 》 2018
摘要：以黄柏粗提物中的生物碱在两相溶剂系统中的分配系数K为依据,对正己烷、石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇、甲醇、丙酮、蒸馏水等进行不同的搭配组合,以筛选出最适合HSCCC分离黄柏中小檗碱、黄柏碱、巴马丁和白瓜蒌碱4种生物碱的溶剂体系。结果表明:在检测波长为280 nm,温度为25℃,流速为2.0 mL/min,转速为800 r/min的色谱条件下,以石油醚︰乙酸乙酯︰甲醇︰蒸馏水=5︰1︰2︰4的溶剂体系分离生物碱类物质的效果最佳,从50.70 mg黄柏粗提物中分离得到小檗碱22.10 mg、黄柏碱15.42 mg、巴马丁0.80 mg和白瓜蒌碱0.20 mg,经HPLC分析其纯度分别为98.27%、98.54%、97.55%和96.28%,回收率达到99.86%。
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梧州茶厂六堡散茶真菌分离与鉴定
《中国茶叶加工 》 2018
摘要：文章选取梧州茶厂4种六堡散茶,分离纯化后得到9种真菌。采用形态观察和真菌核糖体RNA ITS区域序列同源性比对与系统发育分析的方法,将9种真菌鉴定为:菌核青霉(Penicillium sclerotiorum)、江西青霉(Penicillium jiangxiense)、阿姆斯特丹曲霉(Aspergillus amstelodami)、赤曲霉(Aspergillus ruber)、杂色曲霉变种(Aspergillus versicolor)、稻枝孢(Cladosporium oryzae)、Cladosporium asperulation、枝状枝孢(Cladosporium cladosporioides)、无花果假尾孢(Pseudocercospora fici)。
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六堡茶中金花菌的分离与鉴定
《南方农业学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究鉴定六堡茶中的金花菌,为推动六堡茶产业发展提供一定的理论基础。【方法】采用平板涂布法及三点接种法从梧州中茶茶厂2015年11月生产的六堡茶中分离纯化金花菌,以传统的形态学观察法观察菌落特征,利用光学显微镜观察菌丝、分生孢子等结构特征,再结合分子生物学方法对分离获得的菌株进行DNA序列分析,并通过ITS序列进行同源性搜索比对和系统发育进化树分析。【结果】分离获得一株金花菌,命名为LB-1。LB-1菌株的形态特征与散囊菌属很相似,主要表现为:菌落呈金黄色、有同心环、有放射性脊等,其ITS序列与阿姆斯特丹散囊菌(Eurotium amstelodami)的同源性达99%,进一步确定LB-1菌株为阿姆斯特丹散囊菌。【结论】从六堡茶中分离获得的金花菌LB-1为散囊菌属中的阿姆斯特丹散囊菌。在六堡茶加工中,可为LB-1菌提供适宜的环境,促进其大量繁殖,以增强六堡茶的保健功效。
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广西地区葡萄黑痘病病原菌的分离与鉴定
《植物病理学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：采用常规组织分离法对广西南宁、河池两地的葡萄黑痘病菌进行分离、纯化,分别得到37和31株分离菌。经菌落形态观察及r DNA ITS序列分析,南宁37株分离菌为同一菌株,河池31株分离菌为同一菌株,以NN和HC分别代表两地菌株,对它们进行形态学、致病性鉴定及r DNA ITS区域序列分析。结果显示,两地菌株形态学与致病性存在较大差异,但都符合黑痘病菌生长形态。NN菌落为红棕色、近圆形,边缘光滑。菌落中心位置丘状凸起,表面有白色菌丝和透明粘稠的小液滴,周围边缘有较规则的褶皱。HC菌落呈浅橙色、近圆形,边缘光滑。菌落中心位置丘状凸起,表面有少量白色菌丝,无液滴,周围边缘有不规则褶皱隆起。人工接种葡萄后均能引起典型的黑痘病症状,NN致病性强于HC。使用r DNA ITS区域通用引物ITS1F/ITS4进行PCR扩增后,NN和HC分别得到1 124 bp和818 bp的片段。比对结果显示1 124 bp与Elsinoe ampelina(AY826763.1)序列覆盖率达92%,序列一致性达99%;818 bp与Elsinoe ampelina(AY826762.1)序列覆盖率达75%,序列一致性达99%。因此,NN和HC均是引起广西葡萄黑痘病的病原菌。
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秸秆发酵饲料高产蛋白酵母菌株分离和筛选
《中国畜禽种业 》 2017
摘要：为筛选出高产蛋白酵母菌株,推进秸秆发酵饲料在畜牧业中的应用。利用培养基平板划线法从牛瘤胃食糜样本中分离筛选出高产蛋白酵母菌株,通过正交试验优化其培养条件,并依据生长曲线筛选出可作为秸秆发酵饲料用高产蛋白酵母菌。从牛瘤胃食糜样本中共分离获得10株菌落形态和细胞特征较明显的疑似酵母菌株,分别编号为x1~x10。经正交试验L16(44)优化其培养条件,发现在温度32℃、初始p H5.5、接种量12.0%、装液量100ml的条件下,各分离酵母菌的生物产量最高。在10株分离酵母菌株中,生物产量最高的4株分别是x9号、x1号、x10号和x5号。其中,x9号和x1号菌株适的应期较短,在2h后即进入对数生长期,8h后达稳定期;x10号和x5号菌株的适应期较长,4h后进入对数生长期,1 h后进入稳定期。综合酵母菌株的培养条件及生长曲线测定结果,确定假丝酵母属菌株最适宜作为秸秆发酵饲料高产蛋白酵母菌。
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香蕉采后炭疽病生防菌的多重筛选研究
《云南农业大学学报(自然科学) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为获得防治香蕉炭疽病的拮抗菌并客观评价其防病潜力,研究了香蕉炭疽病生防菌的多重筛选方法。试验从不同来源的样品中分离得到997株微生物,经初筛获得具有拮抗作用的菌株280株;从中选取20株拮抗菌进行多重筛选测试。结果表明:拮抗菌对香蕉炭疽病菌菌丝生长、孢子萌发和对蕉果病斑的抑制能力的强弱次序均不相同,且有4株在平皿内能表现抑菌作用的拮抗菌处理蕉果后,炭疽病的发病指数反而升高。因此,单靠一种筛选途径来评价拮抗菌的生防潜力不够客观,多重筛选的方法更有利于获得具有不同防病机制的优良生防菌株。
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广西百色烟草青枯病的危害调查与病原菌分离鉴定
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：2014-2015年对广西百色烟区的烟草青枯病发生危害情况进行了较为全面的调查,并对具有典型青枯病症状的烟株进行病原菌分离及致病性鉴定。结果显示,烟草青枯病在百色市的靖西县、德保县、乐业县和凌云县主要种烟区普遍发生,部分茎下部黑色坏死病株复合感染黑胫病和根黑腐病中的一种或两种病害;隆林县的病害样本没有分离和检测出青枯病菌,推测该县烟草根茎类病害主要为根黑腐病和黑胫病。从百色市各主要烟区采集到疑似烟草青枯病害样本170个,通过特异培养基分离和青枯菌演化型鉴定获得青枯病菌137株,柯赫法则验证共有92株菌株为烟草青枯病致病菌株。选取其中典型菌株D3-12进行病原菌分类学鉴定,通过菌株16S r DNA序列测定和同源性分析,结合菌株的形态学观察、生理生化指标测定,将D3-12菌株鉴定为青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)。
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罗非鱼无乳链球菌的分离鉴定
《贵州畜牧兽医 》 2014
摘要：从南宁市某淡水罗非鱼养殖场的濒死罗非鱼分离获得7株优势菌株,经人工腹腔注射感染罗非鱼,仅发现菌株LFY-5注射后的罗非鱼出现与自然发病罗非鱼相似的症状,死亡率高达60%。经检测,LFY-5菌株为链状或成对排列的革兰氏阳性球菌,单个球形菌体直径为1.0~1.2μm,在血琼脂培养基上呈β-溶血;对阳性克隆进行DNA检测得到长度为1 510 bp的16 S rRNA基因片段,即分离菌株为无乳链球菌(S.agalactiae)。药敏试验结果显示,菌株LFY-5对头孢氨苄、万古霉素、头孢唑啉、头孢哌酮、新生霉素等18种药物高度敏感,但对菌必治、复达欣、替卡西林、头孢噻肟等8种药物不敏感。
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