科研产出
三七主要病害生防真菌F2的抑菌作用测定及其鉴定
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：从三七根际土壤里初步分离筛选到一株对三七多个病原菌具有抑菌作用的真菌F2,研究测试其对三七黑斑病菌(Alternaria panax)、炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)和根腐病菌(Fusarium solani)的抑菌率及其对各病原菌菌丝形态的影响。结果表明,真菌F2对三七黑斑病菌、炭疽病菌和根腐病菌的抑菌率较高,分别为88.67%、91.00%和75.76%。显微观察发现,真菌F2可造成三七黑斑病菌和炭疽病菌菌丝膨大、畸形、断裂,造成三七根腐病菌菌丝断裂。结合形态学和分子生物学特征将生防真菌F2鉴定为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。
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广西淮山根腐线虫病病原鉴定
《南方农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确广西淮山根腐线虫病病原种类,为生产上淮山根腐线虫病的防治提供理论依据。【方法】从广西淮山主产区采集有病斑的淮山块茎,连同根际土壤一起带回实验室;通过直接浸泡分离法和改良贝曼漏斗法分离线虫,应用形态学和分子生物学方法对分离获得的线虫进行种类鉴定。【结果】从淮山病薯和病土中分离到一种线虫,其块茎虫口密度最高达704头/cm~2。线虫虫体蠕虫形,较为短粗,唇区低平,口针粗而短基部球宽,圆形;食道腺覆盖肠腹面,中食道球十分显著,卵圆形雌虫阴门横裂,位于虫体后端,确定为短体线虫属。分离的线虫与咖啡短体线虫的28S rDNA序列同源性最高,与两个已知的咖啡短体线虫在系统发育树上形成一个分支,验证可信度均达97%。【结论】经形态学结合分子生物学分析鉴定,确定危害广西淮山的根腐线虫为咖啡短体线虫(Pratylenchus coffeae)。
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广西百色烟草青枯病的危害调查与病原菌分离鉴定
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：2014-2015年对广西百色烟区的烟草青枯病发生危害情况进行了较为全面的调查,并对具有典型青枯病症状的烟株进行病原菌分离及致病性鉴定。结果显示,烟草青枯病在百色市的靖西县、德保县、乐业县和凌云县主要种烟区普遍发生,部分茎下部黑色坏死病株复合感染黑胫病和根黑腐病中的一种或两种病害;隆林县的病害样本没有分离和检测出青枯病菌,推测该县烟草根茎类病害主要为根黑腐病和黑胫病。从百色市各主要烟区采集到疑似烟草青枯病害样本170个,通过特异培养基分离和青枯菌演化型鉴定获得青枯病菌137株,柯赫法则验证共有92株菌株为烟草青枯病致病菌株。选取其中典型菌株D3-12进行病原菌分类学鉴定,通过菌株16S r DNA序列测定和同源性分析,结合菌株的形态学观察、生理生化指标测定,将D3-12菌株鉴定为青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)。
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利用SSR分子标记技术鉴定和分析茄子杂种F_1的纯度
《南方农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析、鉴定茄子杂种F1纯度,为提高茄子杂交育种效率提供参考依据。【方法】在育苗期,采用SSR分子标记技术对栽培茄×栽培茄正、反杂交种和野生茄×栽培茄杂交种进行纯度鉴定及亲缘关系分析。【结果】从124对SSR引物中筛选出15对在亲本间存在差异、扩增稳定、条带清晰的引物;从210株杂种F1单株中共鉴定出208株真杂种,杂种纯度为99.0%,鉴定结果与田间性状调查结果一致;栽培茄×栽培茄正、反交组合的F1与亲本的亲缘关系均较近,遗传关系差别微小;野生茄×栽培茄组合的F1与父本的亲缘关系均较远,且表现出偏母本遗传。【结论】SSR分子标记技术能快速、准确鉴定茄子杂交后代的纯度,可作为分子标记辅助育种手段用于指导选择符合茄子育种目标的优良杂交品种选育。
关键词： 茄子 SSR分子标记技术 杂种纯度 鉴定 亲缘关系分析
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旱稻孢囊线虫在广西的发生及其rDNA-ITS异质性分析
《中国水稻科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：2011年,从广西龙胜梯田的水稻根系和稻田土壤中分离到一种孢囊线虫。该线虫形态特征与已报道的旱稻孢囊线虫(Heterodera elachista)相符,其rDNA-ITS序列与GenBank中旱稻孢囊线虫的rDNA-ITS序列相似性为97.7%~99.3%。rDNA-ITS分子发育树表明该线虫与旱稻孢囊线虫以100%的置信度及较小的遗传距离形成一个单系,据此将该线虫鉴定为旱稻孢囊线虫。进一步对本研究获得的10条旱稻孢囊线虫rDNA-ITS区序列及Tanha Maafi等报道的1条旱稻孢囊线虫rDNA-ITS序列(AF498391)的酶切位点进行分析,结果发现AluⅠ、AvaⅠ、MvaⅠ和RsaⅠ4个内切酶的酶切位点在11条序列中完全一致,而Bsh1236Ⅰ、BsuRⅠ和CfoⅠ3种酶的酶切位点存在变异,其中Bsh1236Ⅰ和BsuRⅠ有2种变异型,CfoⅠ则有3种变异型,表明旱稻孢囊线虫的rDNA-ITS序列存在DNA异质性。
关键词： 旱稻孢囊线虫 水稻 鉴定 rDNA-ITS 异质性
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碱性纤维素酶产生菌株的筛选及其酶学性质研究
《广西科学 》 2014
摘要：【目的】从堆肥中筛选和鉴定产碱性纤维素酶的菌株,对菌株及其酶学特性进行研究。【方法】以刚果红平板染色法进行初筛,摇瓶发酵复筛,分离到高酶活菌株C73。通过形态观察和16SrRNA序列分析对菌株进行鉴定。采用DNS定糖法测定发酵液酶活最适pH值、pH值稳定性、最适温度、热稳定性及常见金属离子、SDS、EDTA等对酶活的影响。【结果】该菌株形态呈杆状,革兰氏阳性,不产芽孢,适宜在pH值8.0~11.0、30~37℃条件下生长。16SrRNA序列比对发现,该菌株与琼斯氏菌(Jonesiasp.)PC1序列相似度大于99%,初步鉴定为琼斯氏菌属菌株。在发酵培养基中,菌体浓度和CMCase活力分别在40h和50h达到最大值,随着发酵时间的延长发酵液pH值稳定在9.5左右。粗酶液的最适作用pH值为10.0,此时CMCase活力达2.3U/mL。在pH值8.0~11.0的范围内保持60%以上的酶活;最适作用温度为60℃,且在30~80℃的范围内保持60%以上的酶活。金属离子Mn2+、Co2+和(NH4)2SO4对酶活力有较强的抑制作用。【结论】菌株C73呈现较高的碱性CMCase酶活、较高的热稳定性和pH值稳定性,具有良好的工业应用前景。
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Bacillius naganoensis普鲁兰酶基因的分子改造及酶学性质研究
《生物技术 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：目的:通过缺失原酶上氨基酸残基,提高普鲁兰酶的酶活,并对其突变体重组酶进行酶学特性研究。方法:以Bacillius naganoensis基因组DNA为模板,PCR扩增大小为2 781 bp的普鲁兰酶编码基因,并通过PCR方法缺失原酶上的前78个氨基酸残基,获得突变体PulA234,将编码基因酶切连接到表达载体pET-22b(+),转化Escherichia coli BL21(DE3)。IPTG诱导表达后对表达产物进行SDS-PAGE和酶学特性研究。结果:突变体发酵液的酶活是原酶的19倍,SDS-PAGE电泳结果显示有明显特异性条带,分子质量约为100 kDa。该突变酶的最适反应温度为60℃,最适pH为4.75,在pH 3.8~6.6范围内活性稳定,Cu2+、Ca2+对酶活有激活作用。结论:经改造的重组酶酶活力有所提高,具有良好的pH和酸稳定性,为普鲁兰酶酶制剂工业化生产及应用奠定基础。
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芒果MiRab11基因及突变体的原核表达分析
《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为研究芒果MiRab11蛋白的互作及其它生物学功能,本文在MiRab11基因序列基础上,采用重叠PCR定点突变技术,获得了2个结构域突变体Mi-Rab11CA和Mi-Rab11DN,将其构建原核表达载体,并成功转化大肠杆菌BL21。SDS-PAGE结果显示,在28℃条件下,用0.5 mmol/L IPTG诱导4 h,可获得大量可溶性蛋白的表达。将可溶性蛋白经Ni-NTA argrose层析柱纯化并western blot鉴定,该重组蛋白均可与抗His单克隆抗体发生特异性免疫反应。本研究为深入研究芒果pET-Rab11蛋白生理活性、特异性结合位点及功能调控打下良好基础。
关键词： 芒果 MiRab11 突变体蛋白 原核表达 纯化 鉴定
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