科研产出
一株产木聚糖酶菌株的鉴定及产酶条件研究
《南方农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对一株从木薯渣堆中分离得到的产木聚糖酶嗜热真菌JG-50菌株进行分类鉴定,并研究其利用木薯渣固态发酵产酶的最佳条件,为该菌株在农业有机废弃物发酵利用中的应用提供理论依据。【方法】采用真菌形态学观察和26S rDNA基因D1/D2区序列同源性分析方法对JG-50菌株进行分类鉴定,并以单因素试验方法对JG-50菌株产木聚糖酶的最佳碳源、氮源、培养时间、培养温度和培养基初始pH等发酵条件进行优化。【结果】菌株JG-50与嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus isolate MTCC 4890)的26S rDNA序列相似性为99%,结合形态学特征初步鉴定为嗜热子囊菌属的一种。该菌株能以木薯渣为碳源固态发酵产木聚糖酶,其产酶的最佳条件为:以木薯渣为碳源,添加60%麦麸,0.3%蛋白胨和0.2%酵母粉,pH6.0,以此培养基50℃培养8 d,木聚糖酶活可达4625.4U/g(干培养基)。【结论】嗜热真菌JG-50具有较强的产木聚糖酶能力,在农业有机废弃物发酵利用领域具有良好的应用前景。
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荔浦芋疫病病原鉴定及原生质体制备（英文）
《南方农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】鉴定荔浦芋疫病病原及制备原生质体,为荔浦芋病原检测、致病机理研究及健康种苗生产提供科学依据。【方法】对采集自广西荔浦县芋头种植区的芋疫病标样进行分离,通过形态特征和r DNA-ITS分子生物学相结合的方法对其病原进行鉴定,同时对获得的病原菌进行原生质体制备。【结果】通过对分离的芋疫病病原进行致病性测定、形态特征观察,将引起荔浦芋疫病的病原初步鉴定为芋疫霉菌(Phytophthora colocasiae);r DNA-ITS序列分析结果表明,菌株DNA序列与Gen Bank已发表的P.colocasiae不同分离物序列同源性达99%,进一步确定所测菌株为芋疫霉菌。制备获得的芋疫霉菌原生质体呈透明圆形或近圆形,大小不一。【结论】引起荔浦芋疫病的病原为芋疫霉菌,制备的芋疫霉菌原生质体可用于芋疫霉病致病机理研究。
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水稻抗稻瘟病基因Pi25、Pi56(t)、Pit和Pita的分子鉴定
《湖北农业科学 》 2016
摘要：根据抗病基因在抗病材料和感病材料中的SNP位点设计引物,通过PCR扩增或CAPS标记,对16份水稻材料中的4个抗病基因Pi25、Pi56(t)、Pit和Pita进行了鉴定。结果表明,9份水稻材料中携带Pi25,6份材料中携带Pita,1份材料中携带Pit(杂合型),无材料携带Pi56(t)。
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带叶兜兰菌根真菌分离和初步鉴定
《西南农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：了解带叶兜兰菌根真菌的群落组成,为优良菌株的筛选奠定基础,对采自广西乐业县的野生带叶兜兰进行了菌根真菌分离,通过根段直接培养法分离菌根真菌,以确定75%乙醇和10%NaClO的最适表面消毒时间,并应用形态学方法对分离的菌株进行了属的鉴定。研究结果显示,带叶兜兰菌根真菌最适表面消毒时间是75%乙醇8 min,10%NaClO 8 min。从带叶兜兰菌根中分离到的63株真菌,除8株菌株分类地位不能确定外,其余菌株归属于镰刀菌属(Fusarium)、轮层菌属(Daldinia,)、碳团菌属(Hypoxylon)、毛壳菌属(Chaetomiaceae)、胶膜菌属(Tulasnella)5属,其中镰刀菌属和轮层菌属为优势菌属。
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基于时积温的水稻耐热性鉴定方法研究
《南方农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究水稻受高温危害时时积温与其颖花相对结实率的关系,探讨水稻耐热性鉴定方法,为指导水稻耐热新品种鉴定选育提供参考。【方法】以超级稻桂两优2号、优质杂交稻良丰优339和耐热品种N22为材料,利用人工气候室进行控温盆栽,设置不同温度胁迫水平(35和38℃)及胁迫持续时间(2、4、6、8和10 d),产生不同的危害时积温,采用实时抽出穗标记法测定高温胁迫处理下的颖花结实率,以自然条件生长植株的结实率为对照,测定颖花相对结实率。【结果】随高温胁迫的加重,各水稻品种的颖花结实率均逐渐降低;采用32℃为危害温度阈值,时积温与相对结实率间呈负指数关系(Y=116.7e~-0.01x),r~2=0.84*,P<0.05),以相对结实率为50%测算的时积温约85℃·h,其对应的温度胁迫处理为35℃连续处理5 d或38℃连续处理3 d,此时的实际时积温为90℃·h。【结论】利用人工气候室进行水稻开花期高温处理,在自然光照、相对湿度80%条件下,38℃高温连续处理3 d,每天9:30~15:30温度恒定连续处理6 h,达到危害时积温90℃·h,以自然条件下生长植株的结实率为对照,计算其相对结实率。该指标可科学有效地鉴定区分水稻品种间的耐热性差异。
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蚕沙纤维素降解菌HB-2菌株的分离、鉴定及酶活性分析
《南方农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】筛选蚕沙纤维素降解菌株,为蚕沙无害化快速腐熟处理提供优质菌种。【方法】以蚕沙为材料,利用CMC-Na培养基分离蚕沙纤维素降解菌,通过形态学、生化特征和16S rDNA序列测定方法等对分离获得的纤维素降解菌进行分类学鉴定,并研究碳源、氮源、pH、培养时间和培养温度对分离菌株产酶活力的影响。【结果】从蚕沙中筛选出1株高温型细菌,命名为HB-2菌株。根据菌体大小、鞭毛着生位置及数量、16S rDNA核酸序列分析,并结合生理生化特性,HB-2菌株鉴定为短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)。HB-2菌株最佳产酶条件为复合碳源(蚕沙+微晶纤维素+米糠+麸皮)、复合氮源(蛋白胨+酵母膏),产纤维素酶最适反应pH 6.5,最适温度35℃。【结论】HB-2菌株CMCase活性较敏感且产酶量大,具有制成菌剂应用于蚕沙无害化快速腐熟的潜力。
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毛葡萄穗轴溃疡病病原鉴定及防治药剂初步筛选
《植物保护 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：毛葡萄穗轴溃疡病主要危害果穗穗轴,引起果穗枯死和果实大量脱落,造成果实产量降低。本研究对该病的病原菌进行分离、致病性测定,并通过形态学特征、ITS rDNA和EF-1α基因序列分析将该病的主要病原鉴定为小新壳梭孢菌(Neofusicoccum parvum)。通过抑制菌丝生长法在室内初步筛选防治该病的药剂,试验结果表明,在测试的26种药剂中,30%氟硅唑微乳剂、64%噁霜·锰锌可湿性粉剂、70%戊唑·丙森锌可湿性粉剂、70%代森锰锌可湿性粉剂、22.2%抑霉唑乳油、70%丙森锌可湿性粉剂及60%唑醚·代森联水分散粒剂等7种药剂对该病病原的抑制作用较强,抑菌率均达100%,可作为备选药剂进行田间防治试验。
关键词： 毛葡萄 穗轴溃疡病 小新壳梭孢菌 病原鉴定 药剂筛选
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A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备鉴定
《黑龙江畜牧兽医(上半月) 》 2016 北大核心
摘要：为了深入了解VP1蛋白的结构和功能,并建立A型口蹄疫(FMD)血清抗体检测方法,试验采用纯化的重组蛋白pET-32a-VP1免疫Balb/c小鼠,以纯化的重组蛋白pGEX-6p-1-VP1作为检测抗原包被酶标板检测抗体效价.将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,其杂交瘤细胞用间接ELISA法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为1D10、3D12、4E12和5G7.结果表明:这4株单克隆抗体均为IgM亚型和K轻链,单克隆抗体间可能识别同一个表位,或表位重叠性大.4株单克隆抗体均能被A型FMDV阳性血清所阻断,具有特异性,且以单克隆抗体4E12产生的抗体效价最高、稳定性强、亲和力最大,并能与重组蛋白FMDV-A-VP1特异性结合.说明单克隆抗体4E12可作为单克隆抗体竞争ELISA法的竞争抗体用于检测A型FMDV血清抗体.
关键词： A型口蹄疫病毒 VP1蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定 竞争ELISA法
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A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
《黑龙江畜牧兽医 》 2016 北大核心
摘要：为了深入了解VP1蛋白的结构和功能,并建立A型口蹄疫(FMD)血清抗体检测方法,试验采用纯化的重组蛋白p ET-32a-VP1免疫Balb/c小鼠,以纯化的重组蛋白p GEX-6p-1-VP1作为检测抗原包被酶标板检测抗体效价。将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,其杂交瘤细胞用间接ELISA法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为1D10、3D12、4E12和5G7。结果表明:这4株单克隆抗体均为Ig M亚型和κ轻链,单克隆抗体间可能识别同一个表位,或表位重叠性大。4株单克隆抗体均能被A型FMDV阳性血清所阻断,具有特异性,且以单克隆抗体4E12产生的抗体效价最高、稳定性强、亲和力最大,并能与重组蛋白FMDV-A-VP1特异性结合。说明单克隆抗体4E12可作为单克隆抗体竞争ELISA法的竞争抗体用于检测A型FMDV血清抗体。
关键词： A型口蹄疫病毒 VP1蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定 竞争ELISA法
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熵最小算法解析玫瑰精油GC/MS混合谱中的未知组分
《质谱学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：熵最小算法是一种化学计量学算法,它根据实验数据本身就可以从混合谱中重建出纯谱。本研究采用熵最小算法对玫瑰精油GC/MS图谱中的2个共流出峰进行分析,从这些共流出峰中重建出8个纯谱和它们的总离子流浓度,并通过NIST数据库比对定性了其中4个组分。熵最小算法能够快速分析共流出峰中的组分,提高天然产物的分析效率,可应用于天然产物、中药、食品等体系的快速分析。
关键词： 气相色谱-质谱法(GC/MS) 熵最小算法 重建纯谱 定性分析
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