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一株红树林链霉菌所产抑菌活性化合物的分离及其生物合成基因簇的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 黄媛林 1 ; 潘信利 1 ; 陆璐 1 ; 李喆 1 ; 李菲 2 ; 赵静 3 ; 黄庶识 1 ; 胡文进 4 ;

作者机构: 1.广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室

2.广西科学院广西近海海洋环境科学重点实验室

3.广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心非粮生物质酶解国家重点实验室广西生物炼制重点实验室广西生物质工程技术研究中心

4.中山大学附属第一医院

关键词: 红树林;微小链霉菌;植物病原真菌;放线菌素D;生物合成基因簇

期刊名称: 中国抗生素杂志

ISSN: 1001-8689

年卷期: 2021 年 012 期

页码: 1090-1101

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的分离鉴定一株红树林来源具有拮抗真菌活性的链霉菌MCCG 2008,分析其对植物病原真菌香蕉尖孢镰刀菌热带4号小种(Fusarium oxysporum f.sp. cubense tropical race 4)、苹果链格孢菌(Alternaria alstroemeriae)、珍珠李葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)和芒果炭疽菌(Colletotrichum fructicola)的抑制作用,对其所产的抑菌活性化合物进行了分离纯化,并通过基因扩增测序分析与活性化合物生产相关的生物合成基因簇,为进一步调控活性化合物的生产以及结构优化提供依据。方法通过形态观察、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析对MCCG 2008进行初步鉴定;通过发酵液原液、发酵液乙酸乙酯粗提取物和菌丝体丙酮浸提物针对不同植物病原真菌进行了活性测试与效用组成分析;采用液液萃取和柱色谱分离该菌株所产生的具有抑菌活性的次级代谢产物,通过高效液相色谱质谱联用仪和核磁共振仪对活性化合物结构进行解析;设计引物使用PCR扩增该菌中与活性化合物生物合成相关的基因。结果菌株MCCG 2008可形成茂盛的气生菌丝,并产生黄色的可扩散色素,16S rRNA基因序列系统发育分析显示菌株MCCG 2008与微小链霉菌Streptomyces parvulus NBRC 13193T的相似度为100%;在拮抗活性试验中,菌株MCCG 2008对珍珠李葡萄座腔菌的抑制活性最强,抑制率为48.0%,其发酵液乙酸乙酯粗提物和菌丝体丙酮浸提物仅对香蕉尖孢镰刀菌热带4号小种有抑制活性;质谱(MS)和核磁(1H NMR)数据分析表明从菌株MCCG 2008的发酵液中分离得到的活性化合物为放线菌素D;以放线菌素D生产菌为参照,通过序列比对发现MCCG 2008中的同源序列,并通过PCR扩增获得菌株MCCG 2008基因组中与放线菌素D生物合成相关的基因。结论分离自广西红树林根际土壤的链霉菌MCCG 2008初步鉴定为微小链霉菌,其具有拮抗植物病原真菌的生防潜力,所产的活性化合物为放线菌素D。

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[1]无人机投放赤眼蜂防治红树林害虫技术. 罗辑,常明山,李德伟,牟晓伟,程鸿远,蒋学建,吴耀军,邓艳. 2018

[2]红树林主要害虫天敌暗黑赤眼蜂的室内繁殖技术. 罗辑,蒋学建,常明山,吴耀军,李德伟. 2019

[3]芦荟对植物病原真菌生长的抑制效果. 黄思良,丘华. 2001

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