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适用于双向电泳的芒果叶片蛋白提取方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 任惠 1 ; 黄章保 1 ; 苏伟强 1 ; 刘业强 1 ; 李果果 1 ; 刘要鑫 1 ; 王小媚 1 ;

作者机构： 1.广西农业科学院园艺研究所

关键词： 芒果;蛋白提取;双向电泳;蛋白质组

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2015 年 28 卷 06 期

页码： 2696-2700

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一套适用于鉴别"四季芒"成花蛋白表达差异的双向电泳方法,摸索出合适的芒果叶片蛋白提取方案。以"四季芒"芒果叶片为材料,采用TCA-丙酮法、酚抽提乙酸铵沉淀法、改良酚抽提乙酸铵沉淀法等3种芒果叶片蛋白提取方法,进行SDSPAGE和双向电泳,比较这些方法的提取效果。结果表明,改良酚抽提乙酸铵沉淀法比一般酚抽提法获得更高质量的蛋白。对沉淀产物洗涤和干燥步骤的优化能有效提高TCA-丙酮法蛋白提取质量。提取液p H能明显影响改良酚抽提乙酸铵沉淀法所提蛋白的得率、2-DE凝胶蛋白点数量和分布。p H 8.5提取液所提蛋白获得最多的2-DE蛋白点,但在小分子区域蛋白分辨率比p H9.0提取液所提蛋白低。TCA-丙酮法所提蛋白在大分子区域2-DE蛋白点分辨率不如改良酚抽提乙酸铵沉淀法,但小分子和高等电点区蛋白点分辨率却明显好于后者。实验表明改良酚抽提乙酸铵沉淀法和TCA-丙酮法有很强的互补性,可以在双向电泳体系中组成双提取法提高蛋白分辨率。

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