科研产出
响应面法优化甘露醇产丁醇的发酵条件
《化工进展 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以褐藻的主要成分甘露醇为底物,利用丙酮丁醇梭菌ATCC824发酵生产丁醇。采用Plackett-Burma(nP-B)和Box-Behnken优化发酵条件。在Plackett-Burman实验设计时,考察牛肉膏、酵母浸粉、胰蛋白胨、乙酸铵、KH2PO4、MgSO4.7H2O、FeSO4.7H2O、接种量、发酵温度、初始pH值这10个因素对丁醇产量影响,筛选出影响丁醇发酵的重要参数是发酵温度、初始pH值、乙酸铵浓度,利用Box-Behnken设计确定最优发酵条件为发酵温度37.3℃、初始pH值6.38、乙酸铵浓度2.82 g/L。数学模型分析预测最大丁醇产量为8.47 g/L。经实验验证表明,在优化条件下的丁醇产量平均值达到8.52±0.55 g/L。这说明利用统计学方法优化甘露醇的丁醇发酵条件是有效的。
关键词： 甘露醇 丁醇 Plackett-Burman Box-Behnken 丙酮丁醇梭菌
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厌氧梭菌表达载体在大肠杆菌中的直接表达及活性筛选
《应用与环境生物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：厌氧微生物的代谢途径改造、重组基因表达等分子生物学操作步骤多,易造成氧气接触,从而导致厌氧微生物死亡.针对厌氧梭菌-大肠杆菌穿梭载体的构建和筛选问题,利用纤维素内切酶基因Cphy3367作为报告基因,分析穿梭载体的硫解酶启动子在大肠杆菌中启动基因转录表达的可能性.含有重组质粒pSOS95-Cphy3367的大肠杆菌菌株相对于对照菌株生长迟缓,生物量降低.实时定量PCR检测及重组蛋白酶活检测结果中,发现硫解酶启动子在大肠杆菌中能启动基因转录表达,在37℃温度下48 h后达到高峰.表明硫解酶启动子在大肠杆菌中可以被宿主识别和启动基因表达,基因可以翻译成为蛋白质.在厌氧梭菌的穿梭载体构建中,含有硫解酶启动子的载体可以在大肠杆菌中进行重组载体的活性筛选这个步骤,从而降低梭菌厌氧操作的复杂度和难度.
关键词： 厌氧梭菌 硫解酶启动子 大肠杆菌 重组表达 纤维素酶 菌株筛选
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减氮对华南早晚兼用型水稻源库特性的影响及其机理
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：研究了大田条件下氮肥水平(常规施氮肥(187.5 kg/hm2)、减氮28%(135.0 kg/hm2)和不施氮肥(0 kg/hm2)对不同基因型水稻(粤晶丝苗2号、桂香占、华优8305和天优998)的源库特性的影响。结果表明,减氮不会导致华南早晚兼用型水稻产量显著降低在于其能维持或促进水稻的源库协调性。与常规施氮比较,减氮28%有利于提高粤晶丝苗2号、桂香占及华优8305的产量,增幅分别为11.99%,5.51%,6.46%,主要归因于减氮28%能增强后期叶片光合或茎鞘转运而有利于稳定高产形成。减氮28%有利于提高粤晶丝苗2号和桂香占库容和粒叶比,提高华优8305库容有效充实度,而对天优998无显著影响。
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高糖土壤微生物宏基因组文库的构建及β-葡萄糖苷酶基因鉴定
《基因组学与应用生物学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用宏基因组技术构建了高糖土壤微生物的DNA文库,该文库约含9万个克隆,文库外源DNA总容量为3.1×10~9bp。利用活性筛选策略,对文库进行筛选,获得11个β-葡萄糖苷酶的阳性克隆,并对其中2个表达β-葡萄糖苷酶的克隆进行亚克隆和序列分析,获得两个编码新型β-葡萄糖苷酶的基因分别命名为:unbgl3A和unbgl3B。生物信息学分析表明:unbgl3A基因由2241个碱基对组成,unbgl3B基因由2292个碱基对组成。在核苷酸水平上,unbgl3A、unbgl3B与已知数据库中的β-葡萄糖苷酶基因没有任何相似性。在氨基酸水平上,与GenBank数据库中已知β-葡萄糖苷酶的相似性分别为73%和69%。
关键词： 高糖土壤 未培养微生物 宏基因组文库 β-葡萄糖苷酶
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机械同步深施肥对水稻品质和养分吸收利用的影响
《华中农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以超级杂交稻培杂泰丰和超级常规稻玉香油占为材料,通过大田试验,研究精量穴直播水稻机械深施肥对水稻稻米品质、肥料(N、P、K)吸收利用的影响。结果表明:机械深施缓释肥对稻米品质和水稻N、P、K总积累量的影响因施肥量和品种而异。在0～1 500 kg/hm2范围内,增施机械深施缓释肥一定程度上可以提高精米率、整精米率、直链淀粉含量和蛋白质含量,降低垩白粒率。水稻N、P、K总积累量及每100 kg稻谷需N、P、K量与稻米碾磨品质、直链淀粉含量及蛋白质含量呈正相关,与垩白粒率呈负相关。N、P、K稻谷生产效率和干物质生产效率表现出相反趋势。机械深施缓释肥1 200 kg/hm2(F1)是获得较优的品质和较高的养分吸收与利用率的肥料水平。
关键词： 机械深施肥 水稻 直播 稻米品质 养分吸收利用 缓释肥
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不同方法提取木薯茎总RNA效果的比较研究
《北方园艺 》 2013 北大核心
摘要：以木薯为试材,采用异硫氰酸胍法、热硼酸盐法、Trizol法、TransZol Plant试剂盒法4种不同方法分别提取木薯茎中总RNA,并对其提取效果进行了比较分析,探讨木薯总RNA的有效提取方法。结果表明:除了热硼酸盐法不能有效地提取木薯茎中总RNA以外,其余3种方法均能有效地提取木薯茎中总RNA。其中异硫氰酸胍法提取效果最好,不仅提取耗时最短,仅为1.5h,而且提取的总RNA质量和纯度相对最好。该方法是一种适合于木薯茎中总RNA提取的简单高效的方法。
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火龙果不同插条长度对扦插生根及苗木质量的影响
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：为了研究火龙果插条长度对扦插苗生根和苗木质量的影响,以红肉火龙果为材料,将枝蔓剪成10、20、30 cm 3种不同长度的插条进行扦插试验。结果表明,扦插20～40 d,各处理进入生根高峰期;扦插40～100 d,各处理的生根率有显著差异,20、30 cm插条生根率均高于10 cm插条;随插条长度的增加,苗木平均根重明显增加,插条长度与根重成正比;插条腐烂率的高低与插条的长短不存在相关性。对苗木质量的综合评价为:30 cm插条苗木根系发达、抽生枝蔓多且长、长势旺、质量好,其次是20 cm插条,10 cm插条较差。
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地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)外切葡聚糖酶CelB基因的发掘及功能鉴定
《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：从地衣芽孢杆菌的基因组数据中寻找与外切葡聚糖酶相似性高的DNA序列,发现在地衣芽孢杆菌基因组中CelB DNA片段具有很高的序列相似性。在大肠杆菌中对来自地衣芽孢杆菌的CelB基因DNA片段进行表达并纯化蛋白质。CelB蛋白质对纤维素底物具有活性。根据糖基水解酶家族48的保守活性位点设计突变策略对CelB进行突变,突变体丧失对底物的活性,说明它具有糖基水解酶家族48的外切葡聚糖酶的典型活性位点。
关键词： 外切葡聚糖酶 基因组信息学 地衣芽孢杆菌 蛋白质结构 定点突变
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地芽孢杆菌Geobacillus sp.GXS1α-淀粉酶的饱和突变及酶学性质研究
《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用半理性设计方法,在网站Geno3D上以PDB数据库中B.stearothermophilus麦芽糖淀粉酶(BSMA)的三维结构为模板,对AMY(α-淀粉酶)进行三维结构同源建模(二者氨基酸的同源性为33%)。比较同源建模预测的3D结构和模板BSMA的3D结构关键位点,在此基础上通过计算机辅助设计软件ProSa2003,根据能量变化确定了AMY三个饱和突变位点:D192、E221和D289。利用兼并引物对AMY的假定活性中心位点D192、E221和D289的氨基酸分别进行饱和突变,定点(饱和)突变库筛选得到4个有活力的突变子D192A、E221N、E221L和D289L,并对突变酶的酶学性质进行初步研究。
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