文献类型： 中文期刊
作者： 裴建新 1 ; 王治宾 2 ; 罗章 3 ; 韦宇拓 4 ;
作者机构： 1.广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心
2.成都蓉生药业有限责任公司
3.西藏农牧学院食品科学学院
4.广西大学微生物及植物遗传工程教育部重点实验室
关键词： 地芽孢杆菌;α-淀粉酶;酶学性质;饱和突变
期刊名称： 生物技术通报
ISSN： 1002-5464
年卷期： 2013 年 0 卷 10 期
页码： 153-159
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用半理性设计方法,在网站Geno3D上以PDB数据库中B.stearothermophilus麦芽糖淀粉酶(BSMA)的三维结构为模板,对AMY(α-淀粉酶)进行三维结构同源建模(二者氨基酸的同源性为33%)。比较同源建模预测的3D结构和模板BSMA的3D结构关键位点,在此基础上通过计算机辅助设计软件ProSa2003,根据能量变化确定了AMY三个饱和突变位点:D192、E221和D289。利用兼并引物对AMY的假定活性中心位点D192、E221和D289的氨基酸分别进行饱和突变,定点(饱和)突变库筛选得到4个有活力的突变子D192A、E221N、E221L和D289L,并对突变酶的酶学性质进行初步研究。
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