科研产出
树干毕赤酵母CBS5773高浓度木糖发酵乙醇
《中国酿造 》 2010 北大核心
摘要：研究了树干毕赤酵母CBS5773在高浓度木糖条件下发酵乙醇的情况,结果表明,在木糖浓度为200g/L时,树干毕赤酵母仍具有较高产乙醇能力,达0.48mL/10mL。单一添加硫酸铵作为氮源,考察不同pH值、温度、溶解氧对产乙醇的影响,发酵条件为pH4.5、25℃、130r/min时效果最佳。添加不同氮源试验结果表明,添加尿素比添加硫酸铵的效果高出25%,最佳发酵条件为木糖200g/L,蛋白胨0.5g/L,酵母浸膏1.0g/L,CaCl20.25g/L,MgSO40.25g/L,KH2PO42.5g/L,尿素1.0g/L,pH值为4.5,温度30℃,速率150r/min。
关键词： 树干毕赤酵母CBS5773 木糖 发酵 乙醇
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湿润冷冻层化处理和干热处理对柳枝稷种子发芽率的影响
《安徽农业科学 》 2010 北大核心
摘要：[目的]为提高柳枝稷种子发芽率提供参考。[方法]研究湿润冷冻层化和干热处理2种方法在不同温度的不同处理时间对产于华南的柳枝稷种子发芽率影响的规律,比较2种方法对提高柳枝稷种子发芽率的效果及其之间的优缺点,同时找到这2种方法的最佳处理条件。[结果]不同温度的湿润冷冻层化处理都能大幅提高柳枝稷种子的发芽率,其最佳处理条件是4℃处理21 d,发芽率为93.08%;不同温度的干热处理对柳枝稷种子发芽率的影响不同,温度较低(57℃及以下)的时侯能很好地提高发芽率,但较高的温度则对种子造成伤害,使发芽势降低,发芽率下降甚至将种子全部杀死,干热处理的最佳条件是57℃处理45 d,发芽率为91.12%。[结论]湿润冷冻层化和干热处理均能影响柳枝稷种子的发芽率。
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用基因组改组技术改良发酵木糖酵母Candida tropicalis XY-19的耐乙醇性能
《基因组学与应用生物学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：Candida tropicalis XY-19是一株具有优良乙醇发酵性能的发酵木糖酵母,其发酵葡萄糖产乙醇性能与目前酒精工业生产菌种--安琪酒精酵母相近,但XY-19的耐乙醇性能远比安琪酒精酵母差,XY-19在含有超过7%(v/v)乙醇的培养基中不能生长。以XY-19为出发菌株,经紫外线诱变获得了5株能在7.5%(v/v)乙醇的培养基中旺盛生长的突变株,经Co-60诱变获得了8株能在含8%(v/v)乙醇的培养基中旺盛生长的突变株。然后,以紫外线诱变得到的5株菌和Co-60诱变得到的8株菌及耐乙醇性能较好的酿酒酵母(S.cerevisae Angel,S.cerevisae4608和S.cerevisae172)为出发菌株,经过4轮Genome shuffling结合木糖乙醇梯度平板的筛选,获得了4株(G3-13,G3-18,G3-57和G3-60)能够在12%乙醇平板上生长的菌株,其乙醇耐受性比野生菌株XY-19提高了71%,为将XY-19进一步开发成纤维质乙醇发酵的生产菌种奠定基础。本研究结果进一步体现了Genome shuffling技术在改良如乙醇耐受性等多基因控制性状上的突出优势,为工业生产菌种的快速有效改良提供了一种有效的方法。
关键词： 发酵木糖酵母(Candida tropicalis) 乙醇耐受性 基因组改组
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混合菌发酵1,3-丙二醇的初步研究
《生物技术通报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：将表达酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因(GPD1)和3-磷酸甘油酯酶基因(HOR2)的质粒PSE-gpd1-hor2转化到甘油激酶基因(glpK)和甘油脱氢酶基因(gldA)双缺失的大肠杆菌JM109C中,构建产甘油的工程菌JM109C/PSE-gpd1-hor2。接种JM109C/pSE-gpd1-hor2和Klebsiella在含1%葡萄糖的摇瓶发酵培养基中37℃发酵56h,1,3-丙二醇的最高产量为1.28g/L,葡萄糖摩尔转化率为37.5%;在30L发酵罐中发酵68h,1,3-丙二醇的最高产量为24.09g/L,葡萄糖摩尔转化率为38.0%;5g/L的乙酸、乳酸,10g/L的乙醇分别使1,3-丙二醇的产量降低了91.41%、54.68%和51.56%。
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酿酒酵母脂肪酶基因TGL3的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达
《生物技术 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：目的:克隆Saccharomy cescerevisiae脂肪酶基因,并实现其在Pichia pastoris中高效表达。方法:根据NCBIGenBank中已公布的Saccharomyces cerevisiae脂肪酶基因TGL3设计引物,以Saccharomyces cerevisiae总DNA为模板,PCR扩增目的片段,构建重组子pPIC9K-TGL3,转化到Pichia pastoris GS115。结果:扩增得到1929bp的基因片段,与GenBank中公布的序列氨基酸同源性达99.7%,编码的643个氨基酸中有脂肪酶的保守序列GXSXG,位于235～239位。重组子摇瓶发酵120h发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,酶学性质研究表明:该酶的最适作用温度为40℃,在25℃～40℃之间能保持60%以上酶活力。最适pH值为8.5,在pH6.5～9.0之间能保持50%以上的酶活力。除Al3+和Fe2+外,该酶不受Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+、Ni+、Sr2+等多种金属离子的影响。结论:发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,是原菌株的10倍,成功实现了该基因的高效表达。
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利用cDNA-SRAP分析赤霉素诱导甘蔗节间伸长的差异表达
《中国农业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探寻赤霉素诱导甘蔗节间伸长基因表达差异的分子基础,为分离节间伸长相关基因奠定基础。【方法】以新台糖22号为材料,在伸长初期以浓度为200mg·L-1的赤霉素进行叶面喷施,以喷施清水为对照,分别提取总RNA进行等量混合,获得2种不同处理的样品池,采用cDNA-SRAP技术进行基因差异表达分析。【结果】700对引物组合共扩增到约15000条、大小在50—750bp的cDNA片段。在GA3处理组和对照组中,甘蔗幼茎中的转录水平具有很大的差异,获得134条差异条带。从反向Northern杂交结果阳性的S-TDFs中选取24个片段进行克隆和序列分析,按照功能可以将24个差异表达基因片段S-TDFs(cDNA-SRAP transcriptderive dfragments)分为6类,分别为能量与代谢相关基因(4条,占总数的16.67%)、未知功能蛋白基因(6条,占总数的25%)、未知基因(10条,占总数的41.66%)、细胞壁生物合成与修饰相关基因(1条,占总数的4.17%)、信号传导相关基因(2条,占总数的8.33%)和转录因子相关基因(1条,占总数的4.17%)。【结论】cDNA-SRAP完全适用于差异表达分析,从中获得一些与甘蔗节间伸长相关的差异基因片段,这些基因可用于甘蔗节间伸长的分子机理研究。
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聚乙二醇胁迫下甘蔗根系蛋白质差异表达图谱分析
《华中农业大学学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以甘蔗品种ROC22为材料,采用含100 g/L聚乙二醇(PEG)6000的Hoagland营养液模拟干旱胁迫处理,SDS-PAGE电泳技术分析干旱胁迫对甘蔗幼苗根系蛋白质的影响。结果表明:与对照相比,24 h胁迫过程中稳定存在的新增蛋白条带为44.5 ku,可能是应答干旱胁迫的主要新增调节蛋白;57.1和29.0 ku蛋白条带在24 h处理期间相对表达量变化活跃,胁迫初期57.1 ku蛋白条带显著增加,29.0 ku蛋白条带显著下降,胁迫过程中出现起伏变化;而62.7、40.4与48.2 ku蛋白条带在PEG胁迫早期相当长时间保持稳定,后期才出现显著增加与下降;PEG胁迫14 h处理蛋白质条带变化最活跃,新增蛋白分子质量为44.5 ku;消失蛋白分子质量为25.5、18.9 ku;而分子质量为81.8、48.2、38.0、29.0 ku的蛋白条带表达量下降。甘蔗根系蛋白质在响应PEG胁迫的基因表达调控中扮演重要角色,其变化可能与甘蔗PEG胁迫密切相关。
关键词： 甘蔗 根系 干旱胁迫 胁迫蛋白质 SDS-PAGE
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低温胁迫下甘蔗抗寒相关基因的cDNA-SCOT差异显示
《生物技术通报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：为探寻甘蔗在低温协迫下相关基因表达差异的分子基础,探索cDNA-SCOT差异显示的可行性,选用了桂糖28号(抗寒性强)和新台糖22号(抗寒性弱)两个甘蔗品种,分别构建了低温处理与对照的RNA混合池,利用cDNA-SCOT法进行了差异显示研究。102条SCOT引物扩增出600多条带,长度在100-1 800 bp之间。选择其中7条差异片段(TDF),进行回收、克隆和测序。结果表明,利用SCOT方法可以对甘蔗cDNA混合池进行差异显示研究,两个甘蔗品种在低温下有部分相同的基因表达,5个TDF分别与脱水素、半胱氨酸型肽酶、多胺氧化酶、C4磷酸羧化酶和过氧化氢酶基因具有很高的同源性,只在抗寒品种中稳定出现的2个TDF功能未知,可能与甘蔗的抗寒基因表达相关。
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水稻不育系先红A紫叶性状的遗传行为及其应用前景
《种子 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：用新育成的带紫叶色标记的水稻不育系先红A(B)为材料,分别与不同类型的绿叶籼稻、粳稻品种杂交,研究其紫叶性状的遗传行为。结果表明,先红A(B)的紫叶性状由1对紫叶基因控制,一般正常绿叶水稻品种带有1～2对抑制基因可调控该紫叶基因的表达。先红A(B)的紫叶性状及其杂种F1绿叶性状表达稳定,不受光温环境及栽培条件的影响。先红A的紫叶性状是杂交稻种子鉴纯和制种防杂保纯的一种理想标记。先红A配制杂种,可筛选出株叶型好且优势强的组合,显示出良好的应用前景。
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甘蔗天然活性高级醇的超临界流体提取制备与分析
《食品研究与开发 》 2010 北大核心
摘要：利用超临界CO2流体技术提取甘蔗皮渣中甘蔗天然活性高级醇,为甘蔗天然产物无污染提取分离提供技术参考。试验优化不同萃取工艺条件,得出最适条件为萃取压力25MPa,温度50℃,时间4h。通过GC-MS定性定量分析,萃取物纯度高达85%以上,主要成分为C22以上的高级脂肪醇与植物甾醇组分。高级脂肪醇以C22~C30偶碳高级脂肪醇为主,其中以二十八烷醇含量最高,达45%左右;植物甾醇以麦角甾醇和豆甾醇衍生物形式存在,含量为6.33%~8.66%。试验工艺流程简易,所萃取出的甘蔗天然活性高级醇纯度较高,可为保健食品和制药行业提供天然添加辅料。
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