科研产出
高效液相色谱-串联质谱法测定13种甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂在杧果中的残留及膳食摄入风险评估
《农药学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为掌握我国杧果中甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂残留的风险水平,建立了高效液相色谱-串联质谱技术同时测定吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑等13种杀菌剂的分析方法,并运用点评估法对儿童和成人的长期及短期膳食暴露风险进行评估.结果表明:13种杀菌剂在1~100μg/L范围内线性关系良好,决定系数R2≥0.9994,定量限(LOQ)为5μg/kg;在5种不同添加水平下,平均回收率为76%~122%,相对标准偏差(RSD)为0.7%~14%.残留检测结果显示:我国杧果主产区和消费城市1056份全果样品中检出率较高的杀菌剂有吡唑醚菌酯(22.6%)、嘧菌酯(18.5%)和苯醚甲环唑(15.5%).运用杀菌剂50th和97.5th百分位点的残留值分别计算对长期摄入风险的贡献率和短期膳食摄入风险.结果表明:杧果中吡唑醚菌酯等13种杀菌剂对成人和儿童的长期摄入风险的贡献率分别为0.01%~0.5%和0.01%~0.3%,9种有急性参考剂量的杀菌剂残留在成人和儿童中短期暴露风险商分别为0.01%~7.2%和0.02%~28.9%,通过杧果摄入13种杀菌剂对人体产生的长期和短期膳食摄入风险较小.根据上述杀菌剂在我国杧果上的登记情况、GB 2763—2021《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》以及膳食评估结果,建议加强对醚菌酯、丙环唑、腈菌唑、氟硅唑、腈苯唑、氟环唑和三唑醇7种杧果上未登记农药的监管,修订吡唑醚菌酯及制定肟菌酯等杀菌剂在杧果中最大残留限量(MRL).
关键词： 高效液相色谱-串联质谱 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂 三唑类杀菌剂 杧果 残留 膳食摄入风险评估
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红麻HcAOC1基因克隆及响应茉莉酸甲酯的表达模式分析
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：茉莉酸对植物的生长发育、花药开裂具有重要调控作用。丙二烯氧化物环化酶基因（AOC）是茉莉酸合成途径关键基因，在植物生长发育、育性调控过程也发挥关键作用。为了探究红麻茉莉酸合成途径中关键基因（HcAOC1）的调控机理，本研究以红麻细胞质雄性不育系UG93A为材料。利用同源克隆的方法，以UG93A的g DNA和cDNA为模板，成功克隆获得HcAOC1基因全长。其CDS序列为780 bp，编码259个氨基酸残基，蛋白质分子量为28.4 kD，等电点为9.28。HcAOC1系统发育进化树分析结果表明，红麻与棉花、蓖麻、榴莲的亲缘关系较近，与小果野芭蕉、萝卜的亲缘关系较远（GenBank登录号:MW520098）。此外，在花期采用不同浓度的外源茉莉酸甲酯（MeJA）处理红麻。在处理的第0天、5天、10天和15天后取样成熟期花药，利用RT-qPCR分析不同处理时间下HcAOC1的表达差异，发现HcAOC1表达量随着处理时间延长存在先增高后降低的趋势，即0.5 mmol/L （T1）、1 mmol/L （T2）、2 mmol/L （T3）处理在第10天HcAOC1的表达量达最高值，均极显著高于对照组，其在T1浓度处理下HcAOC1表达量最高；在第15天时，三种处理Hc AOC1表达量均明显下降且趋于对照。研究结果表明，Me JA处理能诱导红麻UG93A中Hc AOC1的表达，但在不同浓度的MeJA诱导下，HcAOC1的表达有显著差异，特别在低浓度MeJA诱导下，HcAOC1基因表达量上升较明显。综上所述，HcAOC1的表达受Me JA的诱导变化，暗示MeJA诱导可在茉莉酸合成途径发挥调控作用，为分析红麻UG93A雄性不育机理提供参考依据。
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三种桑黄子实体脂溶性成分的GC-MS分析及抗氧化活性
《生物技术通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：比较分析不同桑黄子实体脂溶性成分差异,并初步探究其抗氧化活性.采用索氏提取法获得脂溶性成分并进行GC-MS分析,计算各化学成分的相对百分含量,测定其还原能力、对DPPH自由基、羟自由基的清除能力分析抗氧化活性.GC-MS结果表明共鉴定到 176 种化合物,JM1、JM2 和JM3 的脂溶性成分分别有 68、75 和 71 种化合物,对化合物进行归类分析发现主要含有烷类、酯类、芳香族类等物质,共有成分共 8 种,相对含量分别占JM1、JM2 和JM3 提取物的 12.88%、9.85%、9.54%,分别为 2,4-二甲基庚烷、乙苯、对二甲苯、苯乙烯、6-十二酮、棕榈酸甲酯、木蜡酸甲酯和四十四烷.3 种子实体中JM1 脂溶性物质具有更好的抗氧化活性.桑黄子实体脂溶性成分含有多种活性物质,具有一定的生物活性,可为深入研究其药理功效和资源开发提供参考.
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蛋白质组学分析染色体加倍对木薯表型及块根形成期代谢产物的影响
《植物生理学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：多倍体育种是木薯种质创新的重要途径。为探讨木薯同源四倍体块根发育特性及其与二倍体的差异,本研究通过对木薯新品种‘新选048’（X048-2x）及其同源四倍体（X048-4x）进行表型鉴定、块根主要农艺性状测定、块根形成期主要代谢产物含量测定及蛋白质组分析。结果发现在块根形成期同源四倍体的平均单株块根数、最长块根长度均显著高于二倍体。同源四倍体薯肉中果糖和木质素含量均显著高于二倍体;筛选出的48个重要差异蛋白富集于细胞胞内,主要参与抗旱性、低温驯化等生物学过程,多数具有碳水化合物结合蛋白和多糖结合蛋白等分子功能。KEGG通路富集分析显示差异蛋白主要富集于苯丙酸生物合成通路,且同源四倍体可能是通过调控苯丙酸生物合成途径的上游介导了木质素积累,增加了块根形成的数量。本研究结果为解析木薯同源四倍体块根发育特性、代谢产物积累与蛋白调控机制奠定了理论基础。
关键词： 木薯同源四倍体 蛋白组 农艺性状 块根发育 代谢产物
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芒果赤霉素氧化酶基因GA3ox的克隆、表达及亚细胞定位分析
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：赤霉素3-氧化酶(gibberellin 3-oxidases,GA3ox)是赤霉素(gibberellic acid,GA)生物合成途径中的关键限速酶之一.芒果中GA3ox基因的功能及其表达模式未见报道.本研究利用RACE技术克隆了一个芒果GA3-氧化酶基因(GA3ox),该基因全长cDNA序列为1 680 bp,编码氨基酸381个,开放阅读框(open reading frame,ORF)为1 146bp,蛋白分子量为42.6 kD,等电点为5.13,不含信号肽,不含跨膜结构域.系统发育树分析发现,该基因编码的蛋白主要与开心果亲缘关系较近,其次为克莱门柚、甜橙、麻疯树等植物.通过拟南芥原生质体亚细胞定位分析发现,该基因主要定位在细胞质中.通过对乔化、矮化芒果品种不同发育时期的叶片的实时荧光定量PCR分析发现,该基因主要在矮化品种中表达量较高,在乔化品种各个时期表达量较低,且差异不大.矮化品种中主要在开花期表达量最高,坐果期7-8周含量最低,但都高于乔化品种的任何取样时期.该基因的克隆和表达分析为下一步功能的研究及其在芒果株形调控分子机制提供理论依据.
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百香果花不同发育阶段花粉活力、柱头可授性及其对坐果的影响
《果树学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探讨百香果花不同发育阶段花粉活力、柱头可授性变化及有效授粉期,为百香果生产及杂交育种提供理论依据.[方法]于百香果花不同发育阶段测定花粉的萌发率、柱头可授性及对花粉、柱头的电镜观察并进行人工授粉,统计坐果率及分析果实特性.[结果]百香果在花前5h时的花粉就具有一定的活力,随后花粉活力不断升高,开花后3 h达到高峰,9 h后花粉活力仅为10.63%,20 h后为0.柱头可授性与花粉活力呈极显著正相关,相关系数为0.711,表明百香果花为雌雄蕊同熟.花前3h授粉的坐果率最高,开花时及花后1h次之,此后随着时间延长不断降低,花后9h的坐果率为0.扫描电镜观察表明花前后不同时间的花粉在外观上无明显变化,柱头在花后7h乳突细胞表面皱缩增多,20 h后柱头皱缩明显.说明可通过观察柱头的乳突细胞外观来判断柱头的可授性,而花粉却不能通过外观判断其活性.花粉活力及柱头可授性与坐果率显著相关,但与单果质量、果实横径、果实纵径、可食率等无显著的相关性,表明花粉活力及柱头可授性只影响坐果率,但对果实特性不产生影响.[结论]百香果花粉及柱头属于雌雄蕊同熟,花粉及柱头的活力期均较短,在开花当天均失去活性,有效授粉期(EPP)为10 h左右,即为开花前3 h到开花后7 h.
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六堡茶渥堆与蒸压工艺真菌多样性研究
《食品工业科技 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：六堡茶独特的感官品质与保健功效与其后发酵过程微生物的参与具有密切联系.为探究六堡茶渥堆与蒸压工艺过程中真菌的多样性及分布规律,利用传统分离培养法与分子生物学鉴定技术对六堡茶毛茶、渥堆各个阶段以及蒸压后共 14个样品中的真菌进行研究.结果表明:从研究样品中分离到 13个属,39种真菌.其中,22种真菌为首次在六堡茶中报道,包括 3种金花菌和 6种酵母菌.研究发现六堡毛茶及渥堆茶样中Aspergillus(曲霉属)和Penicillium(青霉属)是主要的优势菌属,蒸压后,样品中只能分离出Aspergillus niger(黑曲霉)、Aspergillus sydowii(聚多曲霉)、Penicillium laeve、Penicillium gerundense四种真菌,其他曲霉属和青霉属真菌几乎无法检测到.蒸压后的样品中以Talaromyces(篮状菌属)为主要的优势菌属.在种水平上,所有茶样中,Aspergillus niger和Arxula adeninivorans是主要的优势菌种.研究结果丰富了六堡茶加工过程真菌多样性的认知,并为进一步探究不同茶源真菌对六堡茶品质影响提供了材料基础和理论依据.
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火龙果溃疡病菌实时荧光定量PCR内参基因的筛选
《生物技术通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：火龙果溃疡病是由火龙果溃疡病菌引起的重要真菌病害,近年来在世界火龙果产区的爆发严重影响了火龙果产业的发展.为研究火龙果溃疡病菌响应逆境胁迫的基因表达和功能,需要筛选火龙果溃疡病菌在各种条件下表达稳定的内参基因.以火龙果溃疡病菌菌株LJ02 为研究对象,以在马铃薯葡萄糖液体培养基(PDW)培养的菌丝体为对照组,以在LB培养基培养的菌丝体和分别在添加过氧化氢、吡唑醚菌酯和苯醚甲环唑的PDW培养的菌丝体为处理组.利用实时荧光定量PCR技术以及内参基因稳定性评估软件(geNorm、NormFinder、Bestkeeper和RefFinder),评估 18 个候选内参基因(CYT1、SDH2_1、TBCC、SUI1、RPL19、PPH、ATP5B、UBE2_16、RPL13、UBE2_2、PRS17、SUCLA2、ATP5A、TUB1_2、ACT1、EFTU、EF1A和GAPDH)的表达稳定性.结果显示,火龙果溃疡病菌的 18 个候选基因在上述培养条件下的Ct值介于 14.80-24.66 之间,表达水平适中;稳定性最高的内参基因是CYT1,其次为SUI1,GAPDH和ACT1 的稳定性最差;最少使用 2 个内参基因组合可以提高定量PCR分析结果的准确性,此时SUCLA2 和ATP5A是最稳定的内参基因组合.该结果可为研究火龙果溃疡病菌生物学过程中的基因表达提供理论依据.
关键词： 火龙果溃疡病菌 内参基因 实时荧光定量PCR 菌丝生长 表达分析 非生物胁迫 内参基因分析软件
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广西猫儿山高山湿地植物区系特征与群落演替进程
《热带作物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：采用样方调查法对广西猫儿山高山湿地湿生草本植物到木本植物阶段的群落类型、物种多样性、演替度和径级结构进行分析，探究植物区系特征与群落演替进程与趋势。结果共记录到维管植物136种，隶属于62科103属，单属科、单种属所占比例大。物种组成的地理成分较为复杂，属的地理分布兼具热带、亚热带和北温带的过渡特征，包含中国特有分布的3个属及特有树种铁杉，多样性程度较高。铁杉湿地很少见，该区域的铁杉湿地却保持得非常原始，保护意义重大。植物种类数量一般会随着演替进程先增加后减少，在演替中后期出现最大值，植物种类丰富度高低并不能很准确地衡量群落的演替程度。根据重要值划分植物群系，比较各演替度，推测出该区域湿生草本植物到木本植物阶段的演替顺序为笄石菖草丛→条穗薹草草丛→尾叶悬钩子灌丛→中华槭灌丛→华西箭竹灌丛→针阔混交林铁杉群落→常绿阔叶林褐叶青冈+山桂花群落→常绿落叶混交林吴茱萸五加林群落，为自然条件下的正向演替。演替的最终结果会形成顶级群落。分析乔木群落优势种的径级结构，在乔木群落阶段演替进程中，各优势种群落发展趋势为铁杉群落波动较大，褐叶青冈和山桂花为稳定群落，以吴茱萸五加为主要落叶树种的种群发展有衰退趋势。故猫儿山高山湿地自然植被还处在进展演替中，未形成最终稳定的森林群落。
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