科研产出
澳洲坚果MiSTPP5基因在不同组织及低温胁迫的表达分析
《基因组学与应用生物学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：丝氨酸/苏氨酸磷酸酶PP1家族在植物生长发育和响应逆境胁迫中发挥重要的作用.探索澳洲坚果MiSTPP5基因在不同组织中和低温胁迫下的表达规律,可为深入研究PP1家族成员在澳洲坚果生长发育和抗寒分子机制提供理论基础.本研究采用RT?PCR技术克隆澳洲坚果MiSTPP5基因,利用生物信息学分析其编码蛋白,并通过实时荧光定量PCR检测其在澳洲坚果不同组织中及低温胁迫下的表达模式.结果显示,澳洲坚果MiSTPP5含有PP1家族的典型结构域MPP_PP1_PPKL,属于稳定的亲水性蛋白和非分泌跨膜蛋白.MiSTP P 5蛋白以丝氨酸残基磷酸化为主,定位于细胞质的可能性最大(高达65%),其二级和三级结构主要以α螺旋、无规则卷曲和延伸链交错而成.MiSTPP5基因在澳洲坚果的根、茎、叶、花和小果等器官组织中都有表达,其中在叶片中的表达量最高,在根中则最低.在低温胁迫下,MiSTPP5基因在叶片中的表达量呈现"升?降?升?降"的表达模式,总体上受诱导上调表达.因此,澳洲坚果MiSTPP5基因在不同组织中都有表达,并受低温胁迫诱导上调表达.
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不同基质配方对基质养分含量及澳洲坚果幼苗生长的影响
《北方园艺 》 2021 北大核心
摘要：以澳洲坚果优良品种"HAES695"为试材,采用育苗袋栽培方式,分别设置6种不同的基质配方(CK、T1～T5),研究了不同基质配方对基质养分含量及澳洲坚果幼苗生长的影响,以期筛选出适宜澳洲坚果幼苗生长的轻型基质配方。结果表明:澳洲坚果幼苗的生长与基质养分和叶片的全磷含量间存在显著或极显著的相关性。株高和地径与基质中的有效磷、有机质及水解氮均呈极显著正相关,与叶片的全磷分别呈显著和极显著负相关。不同基质配方均显著促进了澳洲坚果幼苗的生长,其中以T3处理表现最佳,其有效磷、有机质和水解氮含量显著高于各处理,平均株高为53.60 cm,比CK增加86.96%,平均地径粗度为10.06 mm,比CK增加34.13%。综上所述,不同基质配方均可显著提高澳洲坚果幼苗的生长,改善基质养分。最佳的基质配比为T3处理,即V(国产基质)∶V(表土)=3∶1。
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澳洲坚果MiSTPP3和MiSTPP7基因克隆与表达分析
《热带作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以澳洲坚果品种‘O.C.’为试材,利用RT-PCR技术克隆获得2个丝氨酸/苏氨酸磷酸酶基因,分别命名为MiSTPP3和MiSTPP7,其编码序列长度分别为2095 bp和1700 bp。序列分析和系统进化分析表明,MiSTPP3含有MPPPP5C结构域,属于PP5亚家族;MiSTPP7含有MPPPP7结构域,属于PP7亚家族。蛋白理化性质和亚细胞定位分析表明,MiSTPP3是一个稳定的亲水性蛋白,可能定位于质膜;MiSTPP7是一个不稳定的亲水性蛋白,可能定位于线粒体基质。生物信息学分析表明,MiSTPP3和MiSTPP7都是非分泌跨膜蛋白,其二级和三级结构的主要元件都是α螺旋、无规则卷曲和延伸链。RT-qPCR分析表明,MiSTPP3和MiSTPP7在澳洲坚果根、茎、叶、花和小果中都有不同的表达量;MiSTPP3受低温胁迫下调表达,而MiSTPP7上调表达,且二者都受干旱胁迫上调表达。因此,推测MiSTPP3和MiSTPP7可能参与澳洲坚果的生长发育及逆境胁迫反应。
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澳洲坚果种质果仁主要营养成分分析与评价
《中国粮油学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以12份澳洲坚果优良种质为试材,通过相关分析与主成分分析等方法,分析不同澳洲坚果种质之间的营养成分差异,挖掘及合理评价现有资源,为澳洲坚果种质资源保护和优异资源的开发利用提供理论依据。结果表明,澳洲坚果果仁的营养成分含量在供试种质之间变化较大,变异幅度在4.60%～24.84%之间,果仁内的变异系数由高到低依次为Ca>Zn>P>Mg>可溶性糖>Fe>蛋白质>氨基酸>K>脂肪。氨基酸含量与Mg含量、Zn含量、蛋白质含量和脂肪含量呈显著正相关,与P含量呈极显著正相关。主成分分析将主要营养成分聚为4个主成分,氨基酸组分因子、矿物质因子、脂肪因子、蛋白质因子,累积贡献率87.91%。根据果仁营养成分含量聚类分析,将12份种质划分成果实营养成分相近、蛋白质和氨基酸含量高、可溶性糖和脂肪含量高的3种类型,且筛选出果实综合品质较好的B7、B4、JW 3个种质。
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澳洲坚果bHLH基因家族成员MibHLH48的结构与功能分析
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：bHLH （Basic/helix-loop-helix）转录因子具有螺旋-环-螺旋结构,在植物中参与调控植物体生长发育、信号传导和抗逆生理等过程。澳洲坚果含有丰富的具有药用和保健价值的营养物质,但其产量和品质问题影响了澳洲坚果产业在中国的发展。为分析bHLH家族成员在澳洲坚果产量形成中的结构与功能,本研究采用电子克隆技术对MibHLH48进行组装拼接,并利用生物信息学方法对其结构进行分析预测。结果表明,MibHLH48 cDNA全长为1 838 bp,开放阅读框的长度为669 bp,共编码222个氨基酸;MibHLH48蛋白存在bHLH结构域,定位于细胞核、无信号肽、无跨膜结构的稳定亲水的bHLH家族蛋白。同源分析表明MibHLH48与荷花NnbHLH48氨基酸序列同源性最高。系统进化分析将MibHLH48与拟南芥AT3G-57800.1 （bHLH060）、AT2G42300.1 （bHLH048）聚为一枝。利用转录组数据分析MibHLH48基因在‘桂热一号’和‘695’澳洲坚果品种枝条、花和叶片中的表达模式表明,MibHLH48在‘桂热一号’品种花中的表达量最高,‘695’品种花中的表达量最低。推测MibHLH48与澳洲坚果产量形成相关。研究结果为研究MibHLH48基因在澳洲坚果中花发育的机理和产量形成机制的作用打下基础。
关键词： 澳洲坚果 MibHLH48 电子克隆 生物信息学 产量
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3个澳洲坚果MYB蛋白靶基因的克隆与生物信息学分析
《农业研究与应用 》 2021
摘要：【目的】为阐明澳洲坚果MYB （v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog）蛋白靶基因的功能及分子作用机制提供了科学的理论依据。【方法】基于澳洲坚果转录组数据和RT-PCR方法克隆澳洲坚果MYB蛋白靶基因,并利用生物信息学分析这些基因编码蛋白质的同源性、系统进化、理化性质、亚细胞定位、跨膜域和信号肽。【结果】获得了3个新的澳洲坚果MYB蛋白靶基因MiTOM1、MiTOM2和MiTOM3,GenBank登录号分别为MT319120、MT319121和MT319122。MiTOM1、MiTOM2和MiTOM3都包含典型结构域VHS-ENTH-ANTH,与其它植物来源的TOM蛋白具有极高的序列相似度,与荷花TOM蛋白（XP＿010260421.1、XP＿010244847.1和XP＿010260421.1）的序列相似度分别高达68.93%、75.76%和68.80%。MiTOM1、MiTOM2和MiTOM3蛋白均为亲水性蛋白。MiTOM1可能定位于细胞核,为非分泌蛋白和非跨膜蛋白;MiTOM2可能定位于细胞质,为跨膜分泌蛋白;MiTOM3可能定位于细胞核或微体,为非分泌蛋白和非跨膜蛋白。蛋白二级结构预测显示,MiTOM1、MiTOM2和MiTOM3二级结构主要含有无规则卷曲和α螺旋。【结论】MiTOM1、 MiTOM2和MiTOM3包含TOM家族典型结构域VHS-ENTH-ANTH,可能在澳洲坚果体内物质运输及控制形态发育方面起重要作用。
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去糖基化对水溶澳洲坚果糖肽结构和抗氧化性的影响
《食品与发酵工业 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为深入了解O-糖链对澳洲坚果糖肽结构和性质的影响,先从澳洲坚果油粕粉中分离纯化澳洲坚果糖肽（macadamia glycopeptide, MGP）、β-消除法脱糖链获得多肽（macadamia glycopeptide peptide, MGPP）后,用Tricine-甘油SDS-PAGE测定其分子质量;比较去糖基化前后糖肽的二级结构、热变性温度、空间结构的差异;采用3种方法（DPPH自由基的清除率、·OH清除率、还原能力）考察了MGP和MGPP的体外抗氧化活性。结果表明,MGP和MGPP都为均一组分,分子质量分别约为12 kDa和9 kDa;糖苷键为O型;β-消除反应后肽链二级结构中α-螺旋、β-折叠减少,热变性温度降低,空间结构变得杂乱无序,抗氧化活性显著降低。综上所述,O-糖基化会影响MGP二级结构和空间结构,从而影响肽链的热稳定性和抗氧化活性。
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黄皮酱加工工艺及其优化
《农业研究与应用 》 2021
摘要：为提高广西特产黄皮果及山黄皮产品的多样性,增加其经济效益,本试验以黄皮果、山黄皮为主要原材料,辅以黄豆酱、澳洲坚果麸粕、蒜米、白砂糖等材料,研究黄皮酱的加工工艺及工艺参数。在单因素试验的基础上,通过正交优化试验及对其感官评价,研究不同配比对产品风味的影响,确定最佳工艺参数为黄皮果400g,山黄皮200g,黄豆酱80g,澳洲竖果麸粕80g,白砂糖75g。通过本试验制得的黄皮酱口感细腻,风味独特,感官评分较高,是一款适宜大众消费的调味食品,对黄皮酱的开发及优化也提高了黄皮果及山黄皮的加工附加值。
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澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1和MiSTPP4克隆与生物信息学分析
《福建农业学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】通过澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1和MiSTPP4克隆与生物信息学分析,以期为阐明澳洲坚果蛋白磷酸酶基因的功能及作用机制提供参考依据。【方法】基于澳洲坚果转录组数据和RT-PCR方法克隆澳洲坚果蛋白磷酸酶基因,利用生物信息学分析基因编码蛋白质的同源性、系统进化、理化性质、磷酸化位点、亚细胞定位、跨膜域和信号肽。【结果】获得2个新的澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1和MiSTPP4,GenBank登录号分别为MT374548和MT374551。氨基酸同源性分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4与其他植物来源的PP1蛋白具有极高的序列相似度,都包含典型结构域MPPPP1PPKL。进化树分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4与PP1家族蛋白的亲缘关系最近。蛋白基本理化性质分析表明,MiSTPP1是一个不稳定的亲水性蛋白,而MiSTPP4蛋白是一个稳定的亲水性蛋白。磷酸化位点分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4都以丝氨酸和苏氨酸磷酸化为主。亚细胞定位、跨膜域和信号肽预测表明,MiSTPP1和MiSTPP4极可能定位于细胞质,且都为非分泌蛋白和非跨膜蛋白。MiSTPP1和MiSTPP4的二级结构和三维结构主要含有α螺旋和无规则卷曲。【结论】MiSTPP1和MiSTPP4属于蛋白磷酸酶PP1家族基因,推测在响应逆境胁迫、信号转导等生理生化过程中发挥作用。
关键词： 澳洲坚果 蛋白磷酸酶PP1 基因克隆 生物信息学分析
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