文献类型： 中文期刊

作者： 何雪梅 ¹ ; 唐雅园 ¹ ; 孙健 ¹ ; 李丽 ¹ ; 向昱 ¹ ; 杨兆杏 ¹ ; 赵承刚 ² ; 韦珍 ¹ ; 唐杰 ¹ ;

作者机构： 1.广西农业科学院农产品加工研究所

2.河池市农业技术推广站

关键词： 香蕉;磷脂酶D;分离纯化;生化特性

期刊名称： 西南农业学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 007 期

页码： 1413-1418

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】分离纯化香蕉磷脂酶D（PLD）并分析其生化特性,为深入研究香蕉PLD打下基础。【方法】采用硫酸铵沉淀结合柱层析法对香蕉PLD粗酶液进行纯化,考察反应体系中香蕉PLD蛋白含量、Ca²⁺浓度、pH和反应时间对PLD活性的影响,明确PLD的生化特性。【结果】80%硫酸铵沉淀结合DEAE-sepharose CL-6B阴离子交换柱、Hitrap SP HP阳离子交换柱和Sephadex G-200凝胶层析柱,可将香蕉PLD粗酶液纯化58.74倍,达到电泳纯,香蕉PLD的相对分子量约为43 kD;香蕉PLD活性最佳测定条件为:PLD蛋白含量30.00μg、Ca²⁺浓度1.20 mmol/L、反应15.00 min、pH 6.5,确定香蕉PLD具有较强亲和力和较高催化活性。【结论】硫酸铵沉淀结合柱层析分离技术适用于香蕉PLD纯化,在PLD蛋白含量30.00μg、Ca²⁺浓度1.20 mmol/L、反应15.00 min及pH 6.5条件下,香蕉PLD活性最高。