文献类型： 中文期刊

作者： 马志林 ¹ ; 陈先锐 ¹ ; 叶柳健 ¹ ; 李检秀 ¹ ; 黄艳燕 ¹ ; 张云开 ¹ ; 蒙健宗 ¹ ;

作者机构： 1.广西大学生命科学与技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心非粮生物质酶解国家重点实验室广西生物质工程技术研究中心广西生物炼制重点实验室

关键词： 合成生物学;辅酶工程;工程菌株;(R)-乙偶姻;发酵优化

期刊名称： 广西科学

ISSN： 1005-9164

年卷期： 2020 年 27 卷 01 期

页码： 49-56

摘要： 本研究拟在大肠杆菌中构建光学纯(R)-乙偶姻的合成途径和利用辅酶工程调控NADH/NAD+氧化还原平衡,并对工程菌发酵(R)-乙偶姻进行优化。将来源于Enterobacter cloacae的α-乙酰乳酸合成酶基因budB、α-乙酰乳酸脱羧酶基因budA和来源于Lactobacillus brevis的NADH氧化酶基因noxE进行密码子优化后组成基因簇,构建表达质粒并导入大肠杆菌,进一步优化工程菌的培养基成分和发酵条件,提高(R)-乙偶姻的合成能力。结果表明:获得专一性合成高光学纯(R)-乙偶姻的大肠杆菌工程菌株GXASR,对其发酵条件进行系统优化后,摇瓶发酵的(R)-乙偶姻产量为36.82g/L,光学纯度达99.1%,发酵罐补料发酵的(R)-乙偶姻产量达到67.65g/L。在大肠杆菌细胞中过表达外源基因簇budB-budA-noxE能够高效合成光学纯(R)-乙偶姻,经发酵优化后,工程菌的(R)-乙偶姻产量、生产强度和得率均显著提高,为代谢工程改造大肠杆菌生产高光学纯(R)-乙偶姻提供了理论基础。