科研产出
香菇单核体交配型及杂交后代的等位基因特异性PCR鉴定
《微生物学通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【背景】食用菌交配型和单单杂交杂合子的鉴定通常采用显微镜检测观察是否具有锁状联合的方式进行，存在耗时长、工作量大且易出现误检等问题。【目的】建立一种鉴定香菇单核体交配型和单单杂交后代的分子辅助育种技术，为提高育种效率提供技术支撑。【方法】利用交配型因子保守序列单核苷酸多态性（single-nucleotide polymorphism, SNP）位点设计分型引物，建立等位基因特异性PCR （allele-specific PCR, AS-PCR）技术，鉴定香菇L808和YX7的单孢分离株交配型及其杂交后代。【结果】AS-PCR鉴定结果表明，L808的38个单孢分离株中，交配型为A1B1、A2B2、A1B2和A2B1的单核体分别有6、13、8和11个；YX7的45个单孢分离株中，交配型为A3B3、A4B4、A3B4和A4B3的单核体分别有15、8、8和12个，交配型为A3A4B3B4的异核体2个；12个单单杂交菌株中，10个为真正的杂合子，2个为非杂合子。传统方法与AS-PCR分子鉴定结果完全一致，但前者容易将异核体误判为单核体。【结论】基于SNP位点的AS-PCR技术能有效鉴别香菇单核体交配型和单单杂交后代，区分单核体与异核体，具有精准、高效的特点，是一种香菇分子辅助育种的理想工具。
关键词： 香菇 交配型 杂交后代 单核苷酸多态性 等位基因特异性PCR
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基于电子鼻的香菇杂交后代香味品质分析
《中国食用菌 》 2023
摘要：为了探讨电子鼻技术评选香菇杂交后代香味品质的效果，以传统感官法为对照，应用该技术评价分析了香菇商品菌株L808和野生菌株YX7，以及19个两者杂交后代的香味品质，同时采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）定量分析了其香菇素含量。结果表明，电子鼻分析与感官评价结果具有良好对应关系，2种方式筛选出的具较高香味品质的11个香菇菌株完全一致。电子鼻传感器W2W和W1W的响应值均显示与GC-MS测定的香菇素含量呈显著正相关关系。电子鼻主成分分析还将21个香菇菌株划分为不同香味类型，并筛选出与野生菌株YX7具相似浓郁香味的杂交后代菌株。可见，电子鼻技术是一种有效的香味品质评价方法，可用于优良香味品质香菇杂交后代的快速初步筛选。
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新型ISSR分子标记鉴别香菇双单杂合子
《热带作物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：杂合子的鉴别是香菇杂交育种中的关键步骤，为了快速准确地鉴别香菇双单杂交后代，本研究设计一种基于区分供体亲本双核的新型ISSR分子标记技术，采用该技术对香菇野生双核菌株YX7为供体和菌株808孢子单核体为受体杂交获得的40个杂交菌株进行鉴别，并以传统的显微观察与拮抗试验和传统ISSR分子标记技术为对照。新型ISSR分析结果表明：仅拥有供体菌株YX7一个核的特异性条带的菌株有27个，可判定为杂合子；其余13个菌株均判定为非杂合子，其中有11个菌株同时拥有供体菌株YX7两个核的特异性条带，是菌株YX7自身；有2个菌株不含供体菌株YX7两个核的任何特异性条带，属于菌株808的孢子单核体。与传统显微观察和拮抗试验方法相比，新型ISSR技术鉴定出的杂合子菌株更全面，不仅包含前者鉴定出的全部19个杂合子，还包括其无法判断的菌株6个和错判为非杂合子的菌株2个。新型ISSR技术采用单个引物就可确定全部27个杂合子菌株和13个非杂合子菌株，并能根据导入的供体细胞核类别将杂合子归为2类，而传统ISSR技术需采用4个引物才能鉴别出27个杂合子，并且不能确定剩余13个菌株为非杂合子，也不能对杂合子进行分类。综上，新型ISSR技术能更快速、全面和精准鉴别香菇双单杂交菌株的杂合子和非杂合子，可为香菇杂交选育和遗传分析提供技术支撑。
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利用SCAR分子标记鉴别香菇双单杂交后代
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】利用SCAR分子标记鉴别香菇双单杂交后代，为香菇分子辅助育种提供技术支撑。【方法】通过ISSR分析获得标识供体亲本菌株YX7两个细胞核的特异性条带，根据特异性条带序列设计SCAR引物，对菌株YX7为供体和菌株808孢子单核体为受体杂交获得的40个杂交菌株进行SCAR-PCR鉴别，并采用传统镜检和拮抗测试方法进行验证。【结果】筛选出分别标识供体菌株YX7两个细胞核核型的特异性条带a和b，据此设计的SCAR引物PA和PB分别对供体菌株YX7的2个不同细胞核具有特异性扩增作用。SCAR-PCR鉴定结果显示，40个待测菌株中，27个菌株为杂合子，其中19个菌株具有a条带标识核型，8个菌株具有b条带标识核型；13个菌株为非杂合子，其中11个菌株同时具有条带a和b标识的两个核型，是菌株YX7本身，另外2个菌株两种核型均未被检测出，属于菌株808的孢子单核体。传统方法验证结果与SCAR分子标记鉴定结果完全一致。与传统方法相比，SCAR标记方法更简便高效、结果更稳定可靠，并可通过核型标识进一步将杂合子分为两组。【结论】SCAR分子标记能高效、全面和精准鉴别香菇双单杂交菌株的杂合子和非杂合子，可应用于香菇杂交分子辅助育种和遗传分析。
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γ-氨基丁酸对香菇采后品质的影响
《食品工业科技 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid, GABA）对采后香菇品质的影响,本文研究了不同浓度的GABA处理对香菇外观和营养品质的影响。结果表明,不同浓度的GABA处理能够不同程度的降低香菇的失重率、相对电导率和丙二醛含量,抑制香菇的呼吸作用、较好的保持香菇的L*值和硬度,同时促进抗坏血酸、总酚和蛋白质的积累。从呼吸强度来看,GABA处理仅在贮藏前期（9 d）抑制香菇的呼吸作用,其中5.0 g·L-1GABA处理的效果最好;从失重率、L*值、硬度等外观品质以及抗坏血酸、总酚、蛋白质等品质指标来看,5.0 g·L-1GABA处理的效果最好;从相对电导率和丙二醛含量来看,2.5 g·L-1 GABA处理的效果最好,但是与5.0 g·L-1GABA处理之间无显著差异。综合考虑GABA对香菇各项指标的影响,确定其最佳处理浓度为5.0 g·L-1。以上结果表明GABA可以通过抑制呼吸,减缓细胞膜的透性的增大,减少香菇的失水进而较好的保持香菇的硬度和色度;同时能够通过促进抗坏血酸、总酚和蛋白质的积累来保持香菇的营养品质。
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