科研产出
氯氟吡氧乙酸异辛酯对沃柑留树保鲜品质的影响
《中国农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:[目的]研究氯氟吡氧乙酸异辛酯处理对沃柑留树保鲜期果实品质的影响,为寻找柑橘留树保鲜常使用 2,4-D保鲜剂的替代物提供理论依据,为延长晚熟柑橘的市场供应期,助力柑橘高质量发展提供技术支撑.[方法]以广西武鸣沃柑为试验材料,在果实转色期进行喷施清水(CK)、氯氟吡氧乙酸异辛酯(YXZ)和 2,4-D三个处理,共喷施 3 次,每次喷施的间隔为 15 d,最后一次喷施后间隔 20 d进行第一次取样,从 12 月中旬到翌年 3 月下旬,每 15 d取样一次,共分为 8 个时期.测定落果率、果实可溶性固形物和可滴定酸、出汁率、乙醇和丙酮酸等生理生化指标;并进行代谢组学和RNA-seq分析,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对差异表达基因进行验证.[结果]YXZ处理组各项指标变化趋势与 2,4-D一致.与CK相比,YXZ处理组落果率降低 0.81-9.76 个百分点,出汁率升高 0.65%—3.56%,能够有效维持果实内部品质.留树保鲜期间 YXZ 处理组果实主要异味物质乙醇含量显著降低,丙酮酸含量及乙醇代谢相关的乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)和丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase,PDC)的活性也显著降低,初生代谢物中脯氨酸、GABA等胁迫响应物质含量下降.基于留树保鲜果实各个时期转录组的WGCNA共表达网络分析,共获得 9 个共表达模块,其中关键模块MEgreen与乙醇和落果率呈显著正相关(P<0.05),KEGG富集分析发现此模块相关基因主要在糖酵解、激素合成、苯丙烷类化合物合成途径相关的通路中富集,如参与乙醇合成的ADH和PDC及参与茉莉酸信号途径中的转录抑制因子茉莉酸ZIM结构域蛋白J AZ.转录组及qRT-PCR证实YXZ和 2,4-D处理可以抑制这些基因的表达.[结论]YXZ处理能抑制ADH和PDC及JAZ的表达,降低ADH和PDC酶的活性,从而降低落果率以及乙醇和甲醇的含量,延缓出汁率降低,维持沃柑果实品质的同时降低胁迫响应物质脯氨酸等初生代谢物的含量,表明 YXZ可作为沃柑留树保鲜处理时 2,4-D 的替代物,延长留树保鲜期 30 d 左右,可将广西武鸣地区的沃柑果实最晚采收期延迟到 3 月中旬.
关键词: 2,4-D 沃柑 氯氟吡氧乙酸异辛酯 留树保鲜 ADH酶 PDC酶 乙醇 落果
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木糖产乙醇微生物的育种研究进展
《广西科学院学报 》 2023
摘要:甘蔗渣水解产物中含量第二高的是木糖,利用微生物高效转化木糖产乙醇是目前蔗渣纤维综合利用的关键途径之一,但野生型酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)不能利用木糖发酵产乙醇,这成为当前纤维素乙醇实现产业化生产的主要瓶颈之一.本文从微生物木糖代谢途径、利用木糖产乙醇的微生物、木糖产乙醇基因工程菌的构建、利用传统诱变方法改良木糖乙醇菌种等4个方面综述当前木糖产乙醇微生物的育种研究进展,指出木糖乙醇发酵最为理想的微生物菌种和最有应用前景的微生物分别是树干毕赤酵母(Pichia stipitis)和酿酒酵母基因工程菌,为改良木糖乙醇微生物提供理论依据.
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利用联合生物加工生产纤维素乙醇的研究进展
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要:联合生物加工(consolidated bioprocessing)是将纤维素酶的产生、纤维素酶解、糖发酵全部同时在一个反应器中完成,整个反应过程由一种微生物或微生物集合体来完成。联合生物加工具有工艺简便、成本低、效率高等优点,被广泛认为是最优的纤维素乙醇生产策略,又被称为第三代生物燃料。本文介绍构建符合联合生物加工要求菌株的2条途径,第1类联合生物加工菌株改造纤维素酶生产菌,使其能够高产乙醇;第2类联合生物加工菌株改造乙醇高产菌株,使其能够分泌纤维素酶。本文还对联合生物加工候选菌株及其优缺点做了概括,为今后研究提供了理论基础和指导方法。
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木糖浓度及补料发酵对树干毕赤酵母乙醇发酵的影响
《中国酿造 》 2018 北大核心
摘要:探究不同浓度木糖及补料对树干毕赤酵母(Pichia stipitis)菌株1K-9发酵木糖产乙醇的影响,提高木糖产乙醇的发酵水平,为扩大规模发酵木糖产乙醇打下基础。结果表明,菌株1K-9先采用10%木糖进行乙醇发酵,36 h补加与10%木糖培养基等体积的20%木糖培养基继续发酵,发酵至108 h时菌数也达到了(12.16±0.07)×10~8个/m L,较未补料发酵时有所提高;发酵108 h时醪液中残留的木糖含量为(1.03±0.02)g/L,较未补料发酵时有所降低;乙醇含量达到了6.56%vol,较未补料时提高了1.85%vol。因此补料发酵是有效的。
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酿酒酵母Mbp1基因缺失突变株耐受性研究
《基因组学与应用生物学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:为了研究Mbp1基因对工业酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)耐受性的影响,在敲除野生型工业酿酒酵母MF1015菌株Mbp1基因的基础上,分析Mbp1基因缺失菌株(突变菌株)与野生型在乙醇耐受性、耐热性、细胞壁完整性、呼吸强度、海藻糖含量、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、乙醇脱氢酶(ADH)活性等方面的差异。结果表明:在含刚果红或SDS的平板上突变菌株的菌落比野生型小、菌体存活率比野生型低;突变菌株的乙醇耐受性和耐热性均下降,在乙醇浓度为9%的液体培养基中,突变菌株的最大OD600约为3.15,而野生型最大OD600值约为3.48;在30℃和37℃时突变菌株和野生型的生长趋势基本一致,而在40℃时,突变菌株最大OD600约为3.0,而野生型约为4.5;用9%乙醇处理后,突变菌株胞内海藻糖含量、过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、乙醇脱氢酶酶活分别比野生型低49%、80%、24%、37%、73%,而未经乙醇处理的突变菌株和野生型酶活无明显差别。推测Mbp1基因有助于工业酿酒酵母适应外部不良环境。
关键词: Mbp1基因 耐受性 酿酒酵母 海藻糖 酶活 乙醇
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酿酒酵母高产菌株的木薯酒精产业化生产试验
《广西科学院学报 》 2015
摘要:【目的】对酿酒酵母高产菌株Ygxas-49木薯酒精产业化应用进行试验。【方法】先在200t发酵罐进行分批发酵,对该菌株的各个发酵指标进行评估,再将可行的方案进一步放大至年产12万t酒精生产线上进行生产稳定性试验,最后为考察该菌在产业化应用上的潜力,在200t发酵罐进行高浓度酒精发酵试验。【结果】200t发酵罐分批发酵结果表明:与生产对照菌株相比,酒度提高8.92%,发酵时间减少12h以上,其他发酵指标基本相同。采用该菌株生产酒精可以提高酒度,大大节约发酵时间,增加设备利用率,从而降低酒精生产成本。12万t酒精生产线稳定运行30d结果表明:与生产对照菌株相比,酒度提高5.35%,发酵时间减少10h以上,其他发酵指标基本相同。200t发酵罐高浓度酒精发酵结果:酒度为15.1%(V/V),发酵时间为56h,与目前文献报道最高生产水平(酒度13.5%,V/V;发酵时间69h)相比,酒度提高11.85%,发酵时间缩短13h。【结论】Ygxas-49菌株应用于工业化生产,各项工艺指标均显著优于国内目前最高水平,具有良好的工业化应用前景。
关键词: 酿酒酵母 木薯 产业化试验 半连续发酵 同步糖化发酵 酒精
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发酵木糖高产乙醇树干毕赤酵母菌株的Co~(60)诱变选育
《广西科学 》 2014
摘要:【目的】选育能够利用木糖高产乙醇的酵母菌株。【方法】采用Co60诱变树干毕赤酵母(Pichia stipitis),筛选乙醇产量高的突变菌株,并对原始菌株、突变菌株的生长发酵特性和两个菌株对高浓度木糖、乙醇的耐受性进行比较。【结果】在YPX培养基上筛选获得1株能够高效发酵木糖的突变菌株1K-9。该菌株在50mL 15%FM发酵84h,发酵液乙醇含量最高达(51.034±0.112)g/L,比原始菌株提高10.05%;在500mL 15%FM发酵96h,乙醇含量最高达(51.390±0.119)g/L;在500mL 20%FM发酵156h,乙醇含量最高达(52.496±0.513)g/L。菌株1K-9在HSM培养基或含4%~5%乙醇的YPX培养基中生长良好,在含6%~7%乙醇的YPX培养基中生长缓慢。【结论】Co60诱变对于树干毕赤酵母(Pichia stipitis)菌株是有效的,能选育出木糖高产乙醇酵母菌株1K-9。
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酿酒酵母YBR019C基因缺失突变的分析
《广西科学 》 2014
摘要:【目的】研究目的基因YBR019C缺失对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株糖代谢和乙醇发酵的影响。【方法】以酿酒酵母野生菌NF1002为出发菌株,选择2号染色体上的基因YBR019C为目的基因,以质粒pUG6和pUG66为模板进行PCR,构建带有Cre/loxP系统的酿酒酵母YBR019C基因敲除组件,并转化酿酒酵母NF1002,利用筛选标记Kan r和Ble r与YBR019C基因进行同源重组,筛选YBR019C双倍体缺陷型菌株。利用蔗糖和甘蔗糖蜜为碳源,对突变菌进行发酵特性的研究。【结果】成功获得YBR019C双倍体缺陷型菌株NFybr。碳源同化实验表明,突变株和野生菌均能利用葡萄糖和蔗糖,不能利用乳糖和木糖;但相比野生菌,突变株利用棉子糖和麦芽糖的能力有所下降,而且完全不能利用半乳糖。蔗糖发酵实验表明:突变株NF-ybr与野生菌株相比,在发酵终点乙醇浓度提高10.7%,发酵周期有所延长。按目前甘蔗糖蜜乙醇生产的发酵工艺,突变株在30℃发酵72h的醪液乙醇含量为12.52%,低于野生菌的13.89%。【结论】YBR019C基因的缺失影响了菌株对糖份的利用,导致乙醇发酵能力不及野生菌。本研究为菌株高效快捷的基因改造提供了参考。
关键词: 酿酒酵母 YBR019C 基因敲除 甘蔗糖蜜 乙醇
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